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Livin基因表达沉默提高前列腺癌细胞 对索坦药物敏感性的研究 硕士研究生：陈骁驰 指导教师：宋希双 教授 专业名称：外科学 摘 要 目的：前列腺癌是严重危害男性生命的恶性肿瘤之一，近年来其发 病率有逐年上升的趋势。前列腺癌的病因尚不明确，可能与遗传、性激 素、种族、食物、环境等因素有关。目前研究发现，某些特殊功能的基 因在前列腺癌的发病、进展及转移中起着重要作用。Livin是最新发现的 细胞凋亡抑制因子家族IAP的新成员，通过抑制细胞凋亡在肿瘤细胞的 发生发展过程中起着重要作用。Livin的高表达与人类肿瘤的发生发展。 预后不良，侵袭能力增加，减弱化疗药物敏感性及缩短患者存活时间等 malate)作为口服小分 方面密切相关。索坦(苹果酸舒尼替尼Sunitinib 子多靶点酪氨酸激酶受体抑制剂，具有中止向肿瘤细胞供应血液的血管 形成和直接攻击肿瘤细胞两种作用机制。其对于VEGF和PDGF的双重 resistant 抑制效应为医治去势难治性前列腺癌(castration prostate cancer)提供了重要的治疗策略。RNA干扰(RNA RNA， 后沉默的方式之一。本实验应用RNA干扰技术使前列腺癌细胞中Livin 基因表达沉默，观察敲除Livin基因后对前列腺癌细胞存活情况及靶向 治疗药物索坦敏感性的影响。 方法： 载体。 Western blot检测转染前后蛋白水平的表达，通过MTT法反映转染前后 细胞存活情况的变化。 3．应用MTT法检测药物索坦(苹果酸舒尼替尼Sunitinibmalate)单 独作用于前列腺癌细胞系PC一3时细胞的存活情况；应用MTT法检测转 染Livin干扰质粒组PC．3细胞中加入索坦时细胞存活情况的变化；计算 靶向治疗药物索坦的IC50． 结果： 1．经限制性内切酶酶切和DNA测序结果表明，成功构建 pSIREN．RetroQ．Livin干扰质粒。 2．Western blot结果表明Livin在前列腺癌细胞系PC．3中表达：转染 外增值被显著抑制。 3．MTT结果表明前列腺癌细胞系PC．3中加入索坦后其存活受到抑 制；索坦与转染干扰质粒联合作用于前列腺癌细胞PC．3时，细胞存活率 相对于单独加入索坦及转染空质粒组显著降低。通过MTT检测并计算 IC50结果表明转染干扰质粒组相对于其他处理组索坦的半抑制率明显降 低。 结论： Livin基因表达沉默可以抑制前列腺癌细胞的增值并提高前列腺癌 细胞对于靶向治疗药物索坦的敏感性。 索坦 RNA干扰 关键词：PC．3 表达沉默 药物敏感性 2 of the Theresearch ofLivin to silencingexpression gene enhancethe of cancer drugsensitivityprostate to cellsSunitinibmalate