植物试管苗玻璃化现象的发生和防治.pdfVIP

植物试管苗玻璃化现象的发生及防治 刘柏林 甘肃农业大学生命科学技术学院，兰州 （730070 ） E-mail ：liubl926@163.com 摘 要：植物试管苗玻璃化现象在不同的植物器官、组织、细胞以及原生质体的组织培养中 普遍存在。玻璃化苗的形态解剖学特征、生理生化特点与正常的试管苗有显著不同。微环境、 基因型、内源激素、植株自身的生理状态等一系列因素影响玻璃化的发生。本文通过研究玻 璃化的发生机制，提出具体的防治措施。 关键词：试管苗；玻璃化现象；发生机制；防治措施 1. 引言 在植物组织的离体培养中，我们常发现有外观形态异常、呈半透明状的试管苗出现，我 们把这种现象称为植物试管苗的玻璃化现象，其出现的概率可高达 100%[1～3]在组织培养中 丝 2 ．玻璃化苗的形态解剖学特征 2.1 形态学特征 与正常苗相比,玻璃苗在形态学上发生了显著变化,其共同特点是:植株矮小肿胀,呈半透 明状;茎短而粗,几乎无节间;叶片厚而狭长,皱缩或卷曲,脆弱易破碎;叶表无角质层,无功能性 气孔器,叶仅有海绵组织,没有栅栏组织[7] 。 Debergh 等[8]描述了洋蓟（Cynara scolymus ）玻璃化苗的形成过程：叶片和小叶柄逐渐 显示出多水，尤其是丛生叶中央的幼叶逐渐肿胀，然后肿胀的小叶突然明显地生长，长度约 为正常叶片的 5～6 倍；绿色叶片变成半透明,最终坏死。 2.2 解剖学特征 茎皮层及髓部的薄壁组织过度生长，细胞间隙大，输导组织发育不良或畸形，导管和管 胞木质化不完全。叶片的栅栏组织细胞层数减少，或仅有海绵组织。叶肉细胞间隙大，表皮 组织发育不良，包括叶表角质层变薄或缺少角质层蜡质，有的是蜡质发育不完全，或蜡质结 晶的结构发生变化。果胶及纤维素等也发育不良。在有些植物玻璃化苗的叶表发现有大量的 排水孔。气孔器数量或多或少，但功能不正常，其原因可能是保卫细胞中胼胝质含量增加， 而纤维素含量减少。叶绿体中基粒和基质的组织结构异常，叶绿素含量低。根茎之间维管组 织联系有缺陷[13] 。 Miguens 等[9]利用扫描电镜观察了曼陀罗（Datura insignis ）正常苗与玻璃化苗叶片的表 面结构，发现玻璃化苗与正常苗的表面结构有相似之处：①两者均是叶片上下表面具有气孔 器；②具有相似的腺毛及非腺毛的分布；③气孔长度、直径及分布相似；④未成熟气 孔的 孔道关闭，在两个保卫细胞之间被一些非结晶状的物质所堵塞。但在两类叶片上，正常气孔 具有典型的肾型保卫细胞，且与生长在田间植物叶片上的气孔器很相近，而异常气 孔器的 保卫细胞畸形，在其垂周或水平面上有突出物或圆形疣突产生，甚至堵塞孔道。正常苗叶片 上有 80 % 的正常气孔器，而玻璃化苗只有 7 % ；玻璃化苗叶片上不正常气孔器的比例达 90 %，他们认为保卫细胞畸形是导致气孔功能异常的主要原因。 -1- 3 ．玻璃苗的生理生化特点 玻璃苗的干物质重、叶绿素含量、蛋白质含量下降、且生根性能极差.与木质素合成有 关的羟基肉桂酸,COA 连接酶和与木质化进程有关的苯丙氨酸氨解酶的活性比正常苗低得 多。玻璃苗中碱性过氧化物酶同工酶活性上升,而酸性过氧化物酶同工酶活性下降。此外,可 溶性酚含量发生明显变化，玻璃苗中元素含量变化较为复杂。丝石竹玻璃苗叶片中P 、Fe、 Cu、Mn 、Co 等元素含量比正常苗低,K、Ca 则较高。而保卫细胞中P 含量比正常苗高。李 云等[11]发现珠美海棠玻璃苗中元素含量低于正常苗的有16 种，包括Cl、Au 、Na 、Mo、Sb、 Mn 、K、F、As 、Zn 、Ca、Mg 、Co、Al 、Br,其含量是正常苗相应元素含量的 31%~92%,元 素Th 和La(镧)高于正常苗含量。值得注意的是各元素在玻璃苗某些部位的分布与总体趋势 并不一致。在玻璃苗中,纤维素及木质素含量下降,珠美海棠玻璃苗中二者合成的速度比正常 苗降低10.38%,降解的速度反而增加1