sirna抑制ak1基因对ra滑膜细胞aggrecanase-1表达的影响.pdfVIP

·中文论著摘要· 表达的影响 目 的 代培养RA(rheumatoidarthritis；类风湿关节炎)滑膜细胞，获取高纯度滑膜 成纤维细胞，转特异性的siRNA染入RA滑膜成纤维细胞内，给予炎性刺激因素 术在RA基因治疗中的可行性。 方法 收集类风湿性关节炎病人膝关节置换术中病变的类风湿性滑膜组织，采用酶 消化法进行体外滑膜细胞的分离培养并传至3．5代，倒置显微镜下观察细胞生长 状态，通过免疫组化鉴定。定制siRNA转染试剂及转染诱导剂，制备可靠的特异 验组)，错配碱基阴性转染对照细胞组、GAPDH．siRNA阳性对照组和未转染细胞 组(对照组)。转染后对各组进行IL．1p干预，收集各组细胞上清液，ELISA方法 比较各组Aggrecanase一1(聚蛋白多糖酶·1)的释放量。 ：日结 木果 该实验4例患者的滑膜细胞标本均采用体外消化培养法成功培养，平均传代 至3～5代，细胞生长状态较好，比较稳定，大约传至第7代时细胞生长减慢，出 现老化状态。免疫组化鉴定滑膜细胞均一地表达Vime