蛋白异构体TSK-GELHPLC色谱柱分析应用总结(中文)120129.pdfVIP

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2016-03-12 发布于安徽
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蛋白异构体TSK-GELHPLC色谱柱分析应用总结(中文)120129.pdf

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蛋白异构体TSK-GELHPLC色谱柱分析应用总结(中文)120129.pdf

蛋白质异构体的HPLC分析～TSK-GEL色谱柱的应用总结～东曹（上海）生物科技有限公司 Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 2012.01 Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 1 背景关于蛋白质的差异性(不均一性) ・翻译后的修饰（酶的作用等）磷酸化（脱磷酸化）、糖基化、脂质化、甲基化、乙酰化、多肽部分的酶切等・分解（酶的作用・非酶的作用）蛋白酶的酶解、脱酰胺、氧化等・其他化学修饰（PEG化等）、变性、聚合等 Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 2 背景蛋白质药物・抗体药物、重组蛋白等已经被广泛应用于治疗方面。・蛋白质差异性的品质管理工作极其重要。・聚合物、变性物质等可能会导致过敏性休克或免疫反应，所以对于它们的分析研究也是非常重要的。基础研究・医药品等的研发・翻译后修饰与分解物的分离分析是必要的。・不仅是蛋白质，DNA、RNA、多肽类药物的研发也同样需要进行此类分析工作。 Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 3 常用的HPLC分析模式 1. 离子交换色谱法(IEC) 2. 尺寸排阻色谱法(SEC) 3. 疏水相互作用色谱法(HIC) Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 4 1. 离子交换色谱法(IEC) Tosoh Bioscience Shanghai Co., Ltd. 5 抗体药物分析实例1 TSKgel CM-STAT(4.6mmI.D.x10cm) 色谱条件 80 色谱柱: TSKgel CM-STAT (4.6mmI.D. x 10cm) 流动相: A; 20mmol/L MES (pH6.0) 70 B; 20mmol/L MES + 500mmol/L NaCl (pH6.0) 梯度: 0min 10% B 60 15min 30% B E 15.1min 100% B 50