第六章目的基因导入受体细胞及重组子的筛选摘要.pptVIP

* * 第六章 目的基因导入受体细胞及重组子的筛选 第一节 受体细胞 受体细胞（receptor cell）：又称宿主细胞或寄主细胞（host cell），从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从实验目的上讲是有应用价值和理论研究价值的细胞。 随着基因工程的发展，从低等的原核细胞，到简单的真核细胞，进一步到结构复杂的高等动、植物细胞都可以作为基因工程的受体细胞。 1.受体细胞的概念 2.受体细胞选择所应遵循的原则 便于重组DNA分子导入。 能使重组DNA分子稳定存在于细胞中。（如：限制性内切酶缺陷型，避免其对重组DNA分子的降解破坏作用。） 便于重组体的筛选。（选择与载体所含的选择标记相匹配的受体细胞基因型） 遗传稳定性高，易于扩大培养或发酵生长。 安全性高，无致病性，不会对外界环境造成生物污染。 选用内源蛋白水解酶基因缺失或蛋白酶含量低的细胞，利于外源基因蛋白表达产物在胞内的积累，或促进外源基因的高效分泌表达。 受体细胞在遗传密码的应用上无明显的偏倚性。 具有较好的转译后加工机制，便于真核目的基因的高效表达。 在理论研究和生产实践上有较高的应用价值。 3.各种类型受体细胞的优缺点 （1）原核细胞 ■优点 大部分原核细胞没有纤维素组成的坚硬细胞壁，便于外源DNA的进入。 没有核膜，染色体DNA没有固定结合的蛋白质，这为外源DNA与裸露的染色体DNA重组减少了麻