喉鳞状细胞癌中tk15蛋白、bubr1蛋白表达及相互作用的研究.pdf

·中文论著摘要· 及相互作用的研究 实验目的 cell 喉鳞状细胞癌(Laryngealsquamous 恶性肿瘤。已有文章报导了STKl5基因扩增、过表达及BUBRl蛋白表达下调与 喉癌发生发展密切相关。本研究通过免疫组化实验方法迸一步证实STKl5、 BUBRl蛋白表达与喉癌的相关性，以及通过免疫荧光共定位实验方法探讨喉癌 组织中STKl5、BUBRl蛋白存在相互作用。 材料和方法 一、标本的来源及制备 40例喉癌组织标本及癌旁正常组织标本均来源于中国医科大学附属第一医 院。患者为2006—2009年问的住院患者，均经病理诊断为喉鳞状细胞癌，均为首发 病例，术前未经放疗和化疗。术后所取标本～组固定于4％多聚甲醛中，送交喉癌 研究室制成蜡块。一组立即储存在．70C冰箱中，待制备冰冻切片。所取标本均经 患者及家属知情同意。 二、实验方法 1、免疫组化实验 应用免疫组化实验(SP法)检测40例喉癌组织标本及癌旁正常组织标本 免疫组化染色，显微镜下观察，拍照，所得图片通过平均光密度值分析STKl5、 BUBRl蛋白表达水平。 2、免疫荧光共定位实验 应用免疫荧光共定位实验判定STKl5、BUBRI蛋白存在共定位。荧光染色切 片在荧光显微镜下观察，荧光染色主要定位于细胞质及细胞核。STKl5蛋白标记 为红色荧光，BUBRl蛋白标记为绿色荧光。若两种标记重叠为黄色荧光，可认为 两种蛋白共定位，提示可能存在相互作用。 3、统计学处理 应用SPSS 10．0统计软件，两样本均数t检验方法进行统计学分析处理。以p 0．05为差异有显著性。检验水准：双Na=o．05。 仕甲 三日7R 1、免疫组化实验结果分析 所得平均光密度值数据采用两样本均数比较t检验，应用统计软件SPSSl0．0进 行统计学分析。计算结果表明：p0．05，有统计学意义。可以认为STKl5平均 光密度值喉癌组癌旁组，BUBRl平均光密度值喉癌组癌旁组，即喉癌组织中 STKl5蛋白表达水平高于癌旁正常组织，而BUBRl蛋白表达水平低于癌旁正常组 5、 织。进一步对喉癌组织STKlBUBRl蛋白表达水平与喉癌临床分期及淋巴结 分期及淋巴结转移相关，STKl5蛋白表达水平随临床分期升高而升高，有淋巴结 转移者高于无淋巴结转移者；而BUBRl蛋白表达水平随临床分期升高而降低；有 淋巴结转移者低于无淋巴结转移者。 2、免疫荧光共定位实验结果分析 色荧光，BUBRl蛋白标记为绿色荧光。两种标记重叠为黄色荧光。可以认为STKl5 和BUBRl两种蛋白在胞质、胞核中共定位，提示可能存在相互作用。 结论 证实STKl5蛋白高表达、BUBRl蛋白表达下调可能与喉癌的发生、发展相关， 且与临床分期及淋巴结转移相关。 2 STKl5蛋白、BUBRl蛋白可能存在相互作用共同影响喉癌的发生、发展，具 体机制还需进一步研究。 关键词 喉鳞状细胞癌；STKl5蛋白；BUBRl蛋白；中心体；纺锤体检控点；免疫组 化；免疫荧光共定位。 ·英文论著摘要· The of betweenSTKl5 studyexpression，interaction and BUBRlinhuman cell laryngealsquamous CarClnoma ect