体外激活的小胶细胞对神经元细胞的作用研究.pdfVIP

摘要 目的 1．建立和完善大鼠脑皮质小胶质细胞原代培养的实验方法和条件；2．探 索原代培养的小胶质细胞经脂多糖(LPS)体外激活后对神经元细胞的影响；3．通 过丁基苯酞(NBP)对小胶质细胞激活过程的影响，探讨国家I类新药NBP可能的 新的作用靶点。 方法原代培养大鼠脑皮质小胶质细胞和神经元细胞；利用LPS刺激小胶质细 胞，建立原代培养的小胶质细胞体外激活的细胞模型；提取LPS激活的小胶质细胞 的培养基上清液作用于神经元细胞，通过四甲基偶氮唑盐(M兀)检测神经元细胞 的存活率；在加入LPS作用前用NBP处理小胶质细胞，通过观察小胶质细胞的形态， ELISA法定量检测炎性因子IL一1B、TNF—Q及IL一10的释放，硝酸还原法检测炎性 介质一氧化氮(NO)，以及MTT检测神经元细胞经其培养基上清液作用后的存活率， 综合评估NBP对小胶质细胞激活的影响。 结果成功培养出数量多、纯度高的大鼠脑皮质小胶质细胞；LPS激活的小胶 质细胞的培养基上清液可致神经元细胞的存活率下降；NBP处理后的小胶质细胞经 9、TNF_a及IL一10的含 LPS作用后，仍呈现为激活形态，其释放的N0减少