嗜麦芽寡养单胞d2株ⅱ型分泌系统gspf、e基因的序列测定及smp基因同源重组载体的构建.pdf

嗜麦芽寡养单胞菌D2株Ⅱ型分泌系统GspF、E基因的 序列测定及smp基因同源重组载体的构建 摘 要 目的本实验室在2003年从海洋生物沙蚕消化道中分离出嗜麦芽寡养单胞菌D2，该 ofS 菌能够大量胞外分泌某蛋白酶(proteasemaltophilfa，SMP)，且纯度高； 课题组前期研究已获得了其完整的编码基因(smp)，并分析发现其可能通过II型分 泌系统分泌。为了能够明确D2株SMP蛋白的分泌表达机制，为该菌的进一步开发与 利用奠定基础，本课题组拟利用同源重组技术使外源基因替换D2茵中的smp基因， 通过研究突变菌株分泌表达生物活性物质的情况，对D2株SMP蛋白表达机制和嗜麦 芽寡养单胞菌II型分泌系统的基因结构及功能进行分析。因此，本文旨在构建用于 D2株II型分泌系统GSP基因簇GspF和GspE两个编码基因的完整序列并进行分析。 csroScan 方法1．通过药敏试验(Mi W／A一40全自动微生物鉴定及药敏分析系统检测 和稀释法)检测嗜麦芽寡养单胞菌D2株的耐药性，以筛选同源重组实验方案中合适 的高保