成年豚鼠膝状神节细胞及螺旋神经节细胞的体外培养.pdf

中文摘要 目的：研究成年豚鼠面神经膝状神经节解剖。对比不同培养条件下膝状神经节细胞 法。 方法：在解剖显微镜下对成年豚鼠颞骨内段面神经进行解剖和观察。通过光镜下观 察解离细胞数，比较胰酶和I型胶原酶对面神经和螺旋神经节的消化效果。消化后 采用下列两种培养方案：(1)用含血清培养基接种，待细胞贴壁后全量换为含血清 替代物的无血清培养基维持培养，(2)用含低浓度血清及有丝分裂抑制剂的培养基 接种并维持培养。分别在培养后第4天、第7天、第1l天和第16天在光学显微镜 下观察GGCs和SGCs的生长特征。选取状态良好的生长期进行神经元细胞的免疫 荧光鉴定。 结果：成年豚鼠的膝状神经节与面神经主干相比没有明显膨大，不易定位。胰酶无 法消化膝状神经节组织，但对螺旋神经节有一定消化能力。I型胶原酶消化后的膝 状神经节组织和螺旋神经节组织可以解离出大量游离细胞。体外GGCs主要为较小 的梭形细胞，细胞核不明显，突起少但长而纤细；细胞呈链状聚集排列：GGCs培 养至第ll天时即出现大量解体。体外SGCs的胞体较大、形状不规则，细胞核清晰 可见，突起较多，临近神经元间形成突触联系；细胞呈片状聚集生长；培养11天 时，含有有丝分裂抑制剂的低浓度血清培养组SGCs出现明显衰退现象；培养至第 16天，两组神经元均大量