脆性x综合征分诊断方法体系的建立及其疾病基因新型可变剪接转录产物的鉴定.pdf

脆性X综合征分子诊断方法体系的建立及其疾病基因 新型可变剪接转录产物的鉴定 中文摘要 Xsyndrome，FXS)是一种常见的遗传性智力障碍疾 脆性X综合征(fragile 病。1991年在Xq27．3处克隆了该病的疾病基因——脆性X智力障碍1基因 l Xmentalretardation (fragile 显子和16个内含子组成，编码一功能未明的RNA结合蛋白。已证实FMRl基 因存在多种可变剪接方式，主要涉及四个外显子，并且在不同组织中其剪接形 式并非一致，但其具体的功能仍未明确。同时，FXS发病率高、临床表现复杂 多样、并存在传递扩展的遗传特性，因此，建立完善的实验室诊断方法尤为重 要。 本研究依据FMRl基因突变的特点，分别从基因组DNA和mRNA两条途 径建立FXS分子诊断方法。采用甲基化特异性PCR，从基因组DNA途径检测 技术，以eDNA为模板，扩增FMRl基因编码区全长序列，再分4个片段进行 二次PCR，并对PCR产物直接测序。利用上述方法对一疑似FXS患者及其家 系成员进行了检测。