腺相关及腺病毒耳基因转染和rb敲除结合isl1表达诱导小鼠毛细胞与支持细胞增殖.pdfVIP

复旦大学博士论文 腺相关及腺病毒内耳基因转染和Rb敲除结合ISLl表达诱导小鼠毛细胞与支持细 胞增殖 中文摘要 低等脊椎动物如鸟类、鱼类的内耳毛细胞损伤后能够终生再生，而哺乳动物耳 蜗毛细胞无自发性再生能力，因此毛细胞丢失所导致的感音神经性耳聋目前仍是临 床治疗中的一大难题。另外一方面，上百种基因突变引起的遗传性耳聋目前没有治 疗方法。因此，研究毛细胞再生以及内耳基因导入方法的发展成为重获听觉的焦点。 分子生物学研究的发展为毛细胞再生带来了希望，内耳的基因治疗和外源性基因的 导入，为耳聋的治疗带来了新的手段。腺病毒及腺相关病毒是内耳基因治疗常见的 载体。为了验证合适的基因治疗的载体，我们使用新近发展的纳升级显微操作导入 系统，大范围的在体研究了12种不同血清型的从V作为基因载体导入的可行性， 我们发现在新生鼠和成年鼠中，不同血清型的从V可以转染不同的内耳感觉上皮 细胞，包括支持细胞和毛细胞。我们还发现在新生鼠(PI／P2)给予内耳注射从V 可以持续表达较长时间，而对听力的影响很小(0．15dB)。这种方法可以用来作 为早期内耳发育过程中基因功能缺失所致的遗传性耳聋的基因治疗手段。