沙田柚配子体自交不亲和花柱消减文库构建及差异表达基因分析.pdf

沙田柚配子体自交不亲和花柱消减文库的构建及 差异表达基因的分析 年级：2005 级 研究生：熊 军 导 师：秦新民 教授 专业：生物化学与分子生物学 研究方向：植物基因工程 中文摘要 沙田柚（Citrus grandis var. Shatinyu Hort. ）为广西的名优水果，属典型的配子体自交 不亲和植物，是研究配子体自交不亲和机理的好材料。然而严重的自交不亲和使沙田柚必 须通过人工授粉才能结果，增加了生产成本。因此，研究沙田柚的自交不亲和机理具有重 要生产实践价值和理论意义。 本研究以沙田柚自、异交花柱为材料，构建了沙田柚自交不亲和花柱抑制性消减杂交 （suppression subtractive hybridization ，SSH ）正反向 cDNA 文库，并对表达序列标签 （expressed sequence tag ，EST ）进行了分析研究。 蓝白斑检验结果表明，正向 SSH 文库重组率为 95%，PCR 检测表明插入片段的平均 长度250bp 左右。随机挑选文库