小鼠阴道上皮细与猪脱细胞真皮基质—纤维蛋白凝胶构建组织工程阴道动物模型的初步研究.pdf

中文摘要 小鼠阴道上皮细胞与猪脱细胞真皮基质一纤维蛋白凝胶构建组织 工程阴道动物模型的初步研究 摘 要 第一部分：小鼠阴道上皮细胞培养及鉴定 目的：探讨小鼠阴道上皮细胞分离、培养和鉴定方法，为构建组织工 程阴道提供种子细胞。 酶消化后分离上皮层，用胰酶进一步消化成细胞悬液接种到K-SFM培养 液中a 2 观察与鉴定：倒置显微镜观察细胞形态、贴壁时间、生长特性； MTT法绘制细胞生长曲线；AEl／AE3免疫组化染色鉴定上皮细胞；扫描 电镜观察细胞超微结构。 结果： 1 消化后细胞多为体积较小的圆形透亮细胞，胞浆均匀；接种 后24----48h细胞开始贴壁，变成宽大扁平细胞；3．-一5d细胞增殖显著， 形成克隆群；7～10 对细胞爬片进行免疫组化染色，胞质呈棕黄色，表明细胞角蛋白存在，显 微镜下计数细胞纯度达98％以上。 3 扫描电镜观察上皮细胞呈镶嵌排列， 表面可见微绒毛和微褶曲。 结论：酶消化法原代培养法细胞贴壁快，生长时间短，细胞增殖良好； 传代培养细胞生长良好，能较迅速为组织工程阴道的构建提供种子细胞。 第二部分：小鼠阴道上皮细胞与猪脱细胞真皮基质．纤维蛋白凝胶支架复 合移植物的生物相容性研究 目的：构建小鼠阴道上皮细胞与PADM．纤维蛋白凝胶支架复合移植 物，并探讨复合支架材料的生物相容性，验证此种构建方式的可行性。 方法： 1 将纤维蛋白原、