猪附红细胞体病cr诊断方法的建立和去脾猪附红细胞体病的研究.pdfVIP

猪附红细胞体病PCR诊断方法的建立和试验性猪附红细胞体病的研究 摘要 附红细胞体病是由附红细胞体 点berythrozoonj寄生于多种动物的红细胞表面、 血浆及骨髓中引起的一种人畜共患病。关于附红细胞体的分类地位目前仍有争议， 传统的分类学方法将附红细胞体列为立克次氏体，但是近年来16SrRNA基因的系 统发育分析的结果表明，附红细胞体更接近于支原体 Mycoptasma 。猪的附红细 胞体病主要引起仔猪发热、贫血苍白、黄疸和母猪流产等症状，常与其他猪病混合 感染危害严重，防治十分困难，给养猪业造成巨大经济损失。 直接镜检是目前临床上诊断该病的主要手段，包括鲜血压片和涂片染色，但该 方法假阳性较多见。动物实验是确诊的手段之一，但所费时间太久。血清学诊断方 等，但由于附红细胞体抗体水平的变化没有规律而常出现假阴性的结果。鉴于上述 原因，为了建立特异准确的诊断方法，本研究开展了附红细胞体病的聚合酶链式反 应 PCR 诊断方法的研究。 根据己报道的附红细胞体基因组的序列 序列号AJ504999 设计了一对引物， 建立了特异性的聚合酶链式反应，扩增片段大小为782bp，然后将扩增产物测序， 测序结果与GenBank上猪附红细胞体序列进行同源性比较，同源性达到99％。特 异性试验表明只有猪附红细胞体模板可以扩增出特异性条带，而健康猪血液、弓形 虫、猪伪狂犬病毒、多杀性