几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法比较.pdfVIP

168 中国实验血液学杂志 Jou rnal of Exper mi ental H em ato lo gy 2006; 14( 1): 168- 172 ( A rticle ID): 2006) 01- 0168- 05 秦慧, 刘霆, 柳斌, 宋鑫, 黄欣, 杨金亮, 赵霞, 魏于全 四川大学华西医院血液科, 人类疾病生物治疗国家重点实验室, 成都 610041 本研究对蛋白质染色法进行比 和分析, 以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法实验 采用 2D 电泳分离急性早幼粒白血病细胞株 NB4的全蛋白及 1D 电泳分离蛋白质分子量标准物, 从蛋白质检测的 灵敏性质谱兼容性操作的简便性等角度, 比 了传统考马斯亮蓝染色法胶体考马斯亮蓝染色法改良考马斯亮 蓝染色法和银染法 4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响, 探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素 结果显示, 银染检测灵敏度最高, 但质谱鉴定相容性差, 鉴定率近 10% ; 改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高, 可 达 4 ng/ pot, 质谱鉴定率可接近 55% 结论: 改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高, 与质谱兼容好, 能满 足蛋白质组研究需要 蛋白质组; 双向凝胶电泳; 蛋白质检测; 考马斯亮蓝染色法; 银染 Q503 A C om parison betw een P rotein D etection M ethods for Tw o D im ensiona l G e l E lectrophoresis QIN Hui, LIU T ing, LIU Bin, SONG Xin, HUANG Xin, YANG Jin Liang, ZHAO Xia, WEI YueQuan D epartm en t of H em atology, Sta te Key Laboratory of B iotherapy for Hum an D i ea e , W e t Ch ina Ho p ita l, Sichu an Un iver ity, C hengdu 610041, C hina Ab stract T he ami of th i tudy w a to com pare and analy ze prote in tain ing in order to elect the op tmi al tain ing m ethod for pro teom ic re earch. Prote in from acute prom yelocy tic leukem ia cell line N B4 and prote in m olecularw e igh t m arker w ere eparated re pectively by 2D or 1D electrophore i and detected re pectiv ely by the ty pical C oom a ie br illiant b lue, the collo idal Co om a ie brillian t b lue, the m o dified C oom a ie br illiant blue and the ilv er tain ing pro to col. T he protein detectio n en itiv ity, com patibility w ith m a pectrom etry ( M S ) and fac ility of the four tain ing pro to col w ere com pared. The re u lt ind icated that the ilv er tain ing exh ib ited the h ighe t en itiv ity and M S how ed the low e t com pa