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0绪论——植物组织培养概述资料.ppt
第一节 植物组织培养的概念 一、植物组织培养的概念: 1.植物组织培养:是指在无菌条件下,将植物体的任何一部分(如器官、组织、细胞以及原生质体等),培养在人工配制的培养基上,并给予合适的培养条件,使之发育形成完整植物体的过程。 由于组织培养是在脱离母体的条件下进行的,所以也称作离体培养。 2、植物组织培养的类型 (1)根据培养基的类型分为: 固体培养: 琼脂、卡拉胶等固化。 半液半固体培养:固液双层。 液体培养:震荡、旋转或静置培养。 (2)根据培养材料(外植体来源)分为: 植株培养:完整植株 胚胎培养:幼胚或成熟胚 器官培养:器官或器官原基 组织培养:各种组织或愈伤组织 细胞培养:单细胞活细胞团 原生质体培养:原生质体 (3)按培养过程分: 初代培养:指对外植体进行的最初的几代培养,称为初代培养。由于其是组培中较困难的阶段,又称为启动阶段或诱导阶段。 目的:诱导外植体上芽的萌发; 产生愈伤组织、原球茎等。 继代培养:将初代培养得到的培养物重新分割,转移到新鲜培养基上继续培养的过程,又称为增殖培养。 目的:防止培养物老化,增殖初代培养的培养物。 生根培养:诱导继代培养得到的无根幼苗产生根,形成完整植株的过程。 目的:诱导生根,提高移栽成活率 二、植物组织培养的特点 1.培养材料来源广泛,遗传性一致; 2.培养条件可人为控制,材料可周年生长; 3.生长周期短,繁殖率高; 4.管理方便,利与自动化控制。 三、植物组织培养的一般工作流程 1.准备阶段: (1)查阅资料,制定培养方案; (2)清洗组培用器皿、工具; (3)配制所需试剂和培养基; (4)试剂、培养基及器皿、工具的灭菌。 2.外植体的选择与消毒; 3.初代培养; 4.继代培养; 5.生根培养; 6.炼苗移栽 第二节 植物组织培养的基本原理 一、植物细胞的全能性——理论基础 1.概念:指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息,在适宜条件下,离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。 植物体的表皮细胞、薄壁细胞、叶肉细胞、筛管、导管、纤维等细胞是否均具有细胞全能型 2.对于细胞全能性需注意的几个问题: (1)活细胞:指细胞具有一个完整的膜系统和一个有生命力的细胞核; (2)离体细胞:细胞只有在脱离母体的情况下才能表现出来; (3)细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度:分化程度越高,其全能性越受限制,越难表达;反之,分化程度越低,其全能性越易表达。 二、植物细胞全能性的实现 (一)全能性表达的条件: 1.无菌条件; 2.离体条件; 3.一定的营养物质; 4.植物生长调节物质; 5.适宜的外界条件。 (二)植物细胞全能性的实现: 1.相关概念: (1)细胞分化:指细胞的形态、结构和功能发生永久性的适度变化的过程。 (2)胚性细胞:指植物成熟种子胚中所有细胞几乎都保持着未分化的状态,具有旺盛的分裂能力,这些细胞称为胚性细胞。 (3)脱分化:指在一定条件下,已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态,并进行细胞分裂形成未分化的细胞团,即愈伤组织的形成过程。 与脱分化有关的因子: ①损伤刺激 ②培养细胞的异质性 ③生长物质的影响 ④光线的影响 (4)再分化:指一定条件下,脱分化形成的愈伤组织转变为具有一定结构、执行一定功能的细胞团和组织,并进一步形成完整指数的过程,即由愈伤组织再生形成完整植株的过程。 2.愈伤组织的形成: (1)诱导期:细胞准备进行分裂的时期,又称启动期。 (2)分裂期:细胞经过诱导后脱分化,不断分裂形成愈伤组织的时期。 (3)分化期:停止分裂的细胞发生生理代谢变化而形成形态和功能各异的细胞的时期。 3.优良愈伤组织的特征: (1)具有旺盛的增殖能力; (2)容易散碎; (3)具有高度的胚性或再分化能力,便于植株再生; (4)经过长期的继代保存而不丧失胚性。 4.全能性的实现过程: 5.植物的形态建成: (1)器官发生型:由愈伤组织再分化为根或芽的过程。 ①先分化形成芽,然后在芽基部长根 ②先分化形成根,然后在根基部长芽 ③同时形成芽和根 (2)胚状体发生型: ①胚状体:又称为体细胞胚,植物在离体培养中,由体细胞诱导形成的胚,称为胚状体。 ②胚状体的特性——两极性; ③胚状体的发育过程:原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶胚 ④人工种子:又称为合成种子或体细胞种子,将胚状体或不定芽包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,在适宜条件下可发芽出苗的类似种子的颗粒体。 (3)原球茎型:兰科植物的主要成苗类型 (4)芽再生型:直接由外植体上的芽或芽原基萌发成
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