多色荧光原位杂在膀胱癌诊断及监测中的意义.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………… Ⅰ 英文摘要………………………………………………………………Ⅲ 英文缩略略词表………………………………………………………Ⅵ 前言………………………………………………………………………1 1 材料和方法…………………………………………………………… 6 1.1 主要试剂与耗材…………………………………………………… 6 1.2 溶液配制方案………………………………………………………6 1.3 主要仪器和溶器……………………………………………………7 1.4 标本收集……………………………………………………………8 1.4.1 膀胱移行细胞癌尿脱落细胞和组织标本……………………… 8 1.4.2 对照组尿脱落细胞标本………………………………………… 8 1.5 标本制备……………………………………………………………8 1.5.1 膀胱移行细胞癌及对照病变组织标本苏木素-伊红染色片的制 备…………………………………………………………………………9 1.5.2 膀胱移行细胞癌及对照病变尿脱落细胞标本苏木素-伊红染色 片的制备……………………………………………………………… 10 1.5.3 膀胱移行细胞癌及对照病例的尿脱落细胞间期核片的制备…11 1.6 间期核片杂交前的预处理……………………………………… 12 1.7 变性与杂交……………………………………………………… 13 1.8 杂交后洗涤……………………………………………………… 13 1.9 杂交信号检测…………………………………………………… 14 1.9.1 M-FISH 图像的获取………………………………………… 14 1.9.2 M-FISH 图像的分析………………………………………… 14 1.10 结果判断…………………………………………………………14 1.10.1 染色体畸变的判定…………………………………………… 14 1.11 统计学分析………………………………………………………15 2 结果………………………………………………………………… 16 2.1 对照组尿脱落细胞HE染色结果…………………………………16 2.2 对照组M-FISH结果………………………………………………16 2.3 尿路上皮癌患者M-FISH结果……………………………………17 2.4 M-FISH 的客观性、优越性……………………………………… 18 2.5 M-FISH与尿脱落细胞学诊断试验评价………………………… 19 2.6 各临床分期肿瘤的M-FISH检测结果……………………………19 2.7 各病理分级肿瘤的M-FISH检测结果……………………………20 2.8 M-FISH检测结果与肿瘤复发的关系…………………………… 20 2.9 各染色体在BTCC尿脱落细胞M-FISH检测中的畸变率……… 21 2.10 各染色体畸变与膀胱癌分级分期的关系………………………21 3 讨论………………………………………………………………… 23 3.1 FISH技术用于膀胱癌诊断的有效性和可行性………………… 23 3.2 FISH与肿瘤分期、分级的关系……………………………………24 3.3 染色体畸变与肿瘤分期、分级的关系……………………………25 3.4 染色体畸变与肿瘤复发及进展的关系………………………… 26 4 结论…………………………………………………………………27 参考文献………………………………………………………………28 综述……………………………………………………………………34 综述参考文献…………………………………………………………42 多色荧光原位杂交在膀胱癌 诊断及监测中的意义 中 文 摘 要 目的 膀胱移行细胞癌是泌尿男生殖系统最常见的恶性肿瘤,高 复发率是其最显著的特征。早期诊断、尽早发现复发，及时治疗是提 高疗效的关键。膀胱移行细胞癌中常存在染色体畸变, 多色荧光原位 杂交(Multicolor Fluorescence in Situ