大鼠骨髓来源树细胞的体外培养及功能测定.pdf

j j。 j．．．r f f，一菇∞霸■幔心●j 目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………3 研究论文大鼠骨髓来源树突细胞的体外培养及功能测定 前言………………………………………………………………………5目lJ舌………………………………………………………………………5 材料与方法………………………………………………………………5 结果…………………………………………………………………8 附图…………………………………………………………………9 附表………。…………………………………………………………11 讨{念……………………………………………………………………12 结论……………………………………………………………………14 参考文献………………………………………………………………l6 综j苤…………………………………………………………………………20 致谢…………………………………………………………………………31 个人简历……………………………………………………………………32 4 I． 中文摘要 大鼠骨髓来源树突细胞的体外培养及功能测定 摘 要 目的：树突细胞(dendriticcell，DC)源于造血干细胞，广泛分布淋巴 组织和非淋巴组织，是机体内功能最强的抗原呈递细胞(antigen presentingcell，APS)。DC与其他抗原呈递细胞相比其最大的特点是能显 著刺激初始型T细胞增殖。而其他抗原呈递细胞仅能刺激已活化的或记 忆性T细胞，因此DC是机体免疫反应的始动者，在免疫反应应答中具 有独特的地位。目前认为具有典型的树突状形态，膜表面高表达主要组 织相容性复合体．II(majorhistocompability 子，能移行至淋巴器官和刺激初始型T细胞增殖活化，并且具有一些相 对特异的表面标志的一类细胞方能称之为DC。所以要鉴定是否是DC往 往通过形态学，组合型表面标志和刺激初始型T细胞增殖能力三个方面 象，应用大鼠骨髓来源DC的体外诱导与扩增，以光镜、扫描电镜观察 DC的形态学检测细胞形态变化以及DC表型分析来研究大鼠骨髓来源树 突细胞的体外培养及功能测定。 方法： 80--． 2009)作为实验对象。获取大鼠骨髓来源IX2，并分为实验组和对照 与扩增。培养期间隔日半量换液1次，并于倒置相差显微镜下观察细胞生 长状况和形态，分别培养13天后收获悬浮细胞。 (2)观察DC形态 学：①光镜观察：培养期间每天用倒置显微镜观察细胞形态变化。②扫描 电镜观察(培养13天的实验组DC用扫描电镜进行观察)。(3)流式细胞仪 检测细胞表面表型。用相同荧光素直接标记的同分异构抗体代替标记抗 体作对照。 (4)制备淋巴细胞悬液并进行细胞分离，将其分别与实验组 和对照组DC细胞按不同比例混合，孵