整合素连接激酶ilk)在胰腺癌中的表达及意义.pdfVIP

·中文论著摘要· 整合素连接激酶(ILK)在胰腺癌中的表达及意义 ．▲L—●一 刖 置 肿瘤的形成与发展是一个多基因、多步骤、多阶段的病理过程，胰腺癌是消 化系统常见的恶性肿瘤之一。是预后非常差的恶性肿瘤。胰腺癌的解剖部位以及 早期缺少特异的症状使得早期诊断很困难，胰腺癌在早期阶段就能入侵周围组织 和转移，并对化疗，放疗等常规治疗效果不佳。外科手术切除成为了可能治愈该 疾病的唯一机会，但是目前外科手术仅限于疾病的早期阶段，大多数病人在手术 后会出现复发，远处转移并在短期内死亡。研究胰腺癌浸润和转移的机制已成为 目前研究的热点。而整合素连接激酶(Integrin--LinkedKinase，ILK)作为一 种丝／苏氨酸蛋白激酶是多种致瘤相关因素的上游交叉点，在细胞与细胞外基质 (ECM)的粘连中起到分子支架的作用，同时还参与了多种信号传导途径。在细胞 粘附、信号传导、细胞周期等多方面影响肿瘤的形成、增殖、侵袭和转移，从而 成为近年来的一个研究热点。 ILK在正常组织中表达有限，但在人类神经源性肿瘤、胃癌、前列腺癌、卵 巢肿瘤、黑色素瘤、结肠癌，肺癌中整合素链接激酶(ILK)表达明显增高且表达 量与肿瘤的恶性程度及转移显著相关。目前，关于整合素链接激酶(ILK)与胰腺 癌相关性的研究国内外还少有报导，为此，本实验运用免疫组织化学S-P法和 Western blot法，结合完整的临床资料，对胰腺癌及其胰腺正常组织中整合素链 接激酶(ILK)的表达情况进行研究，并分析整合素链接激酶(ILK)与临床病理 因素的关系，以探讨它在胰腺癌中的表达及意义。 材料与方法 一、材料 60例胰腺癌及32例正常胰腺组织均来自中国医科大学附属第一医院1990-- 2008年手术切除存档蜡块。组织均经10％甲醛固定，常规石蜡包埋。10例胰腺 癌及其J下常组织来自中国医科大学附属第一临床医院普外科2007年5月--2008 1 年9月手术切除标本。 二、方法 (一)免疫组织化学染色： 检测ILK表达采用链菌素抗生物素蛋白一过氧化物酶免疫组化法(S-P法)。结 果判定：ILK蛋白表达定位于细胞浆，光镜下每张切片选择3个高倍视野，每高倍 视野计数100个瘤细胞，由3名病理医师独立计数。细胞浆和细胞膜中染色黄色或 淡黄色为阳性，显微镜下观察细胞染色比率，染色比率大于30％为阳性 (二)Westernblot： 检测ILK在正常胰腺组织和胰腺癌中的表达。取新鲜样品(1—2克)加5倍裂 解缓冲液，剪碎、匀浆超声处理，高速低温离心提取上清蛋白，电泳，转印，经 封闭后加相应的一抗、二抗及显色试剂检测。结果判定为转印膜上出现清晰的蓝 Stand Alone电泳凝胶分析软件测定 紫色条带为阳性，实验结果用FluorChemV2．0 灰度值作为定量指标，来判断ILK蛋白相对含量。 三、统计学分析 forwindows 采用SPSS 10．ok件，对IIK表达与临床病理特征的关系采用 x2检验。将蛋白印迹结果的灰度值分为胰腺癌组和正常组进行配对t检验。PO．05 有显著意义。 结 果 一．ILK在正常胰腺组织和胰腺癌组织中的表达 在正常的胰腺组织中ILK呈阴性表达，在胰腺癌组织中ILK呈阳性表达． Western Blot结果显示：ILK在胰腺癌和正常组织中有不同程度的表达，在 胰腺癌组织中的表达明显高于相应的胰腺正常组织。 二．ILK的表达与胰腺癌的临床病理因素的关系 和淋巴结转移(PO．05)相关，与分化程度无关(PO．05)。 当日结 论，匕： 2 一．ILK在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织。 二．胰腺癌中，ILK表达与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关，