22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数资料.pptVIP

* 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 微生物脲酶 课题背景 CO(NH2)2 + H2O CO2 +2NH3 植物氮源 吸收 尿素 ※常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌。 课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 一 研究思路 （一）筛选菌株 微生物菌群 耐热细菌Taq 热泉 高温筛选 Taq DNA聚合酶 分离 1.筛选实例 2.筛选原理 控制培养条件 （营养、温度、pH） 目的菌株 其他微生物 抑制 利于 3.土壤中分解尿素的细菌的分离 15.0 琼脂 1.0 尿素 10.0 葡萄糖 0.2 MgSO4·7H2O 2.1 NaH2PO4 1.4 KH2PO4 含量（g/L） 成分 主要碳源： 氮源： 葡萄糖 只有尿素 ※此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？ 能。只有能产生脲酶的细菌才可以利用尿素作为氮源而生存。 ——允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 ※选择培养基 1.间接计数法（活菌计数法） 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M 常用方法：稀释涂布平板法 （1）原理： （2）计算： 1个菌落 1个活菌 稀释度足够高 固体培养基 C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V：涂布平