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A β 拟痴呆小鼠模型的建立及梓醇药理作用的初步研究 25-35 摘 要 目的 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease ，AD ）是老年人常见的 疾病。研究发现AD最主要的病理变化之一是β-淀粉样肽在基底核的 沉积,造成胆碱能神经元损伤，导致大脑胆碱能系统的功能障碍。迄 今为止，AD 尚没有理想的动物模型，每种模型都只是模拟AD 的一部 分病理学特征，使AD 的研究受到一定限制。本实验室曾成功建立了 SD 大鼠单侧脑基底核部位联合注射淀粉样肽Aβ25-35 和鹅蕈膏酸 （Ibotenic acid ，IBO ）的拟痴呆模型。小鼠与大鼠相比，更适合于暂 时只能得到较少量药物样品而又需长期喂服的情况。为此，我们建立 了NH 小鼠单侧脑基底核部位注射淀粉样肽Aβ25-35 和IBO造成的拟痴 呆动物模型并用它对梓醇的药理作用进行了初步研究。 方法 根据小鼠脑立体定位图谱所示，NH小鼠右侧脑基底核部位 一次性定位注射淀粉样肽Aβ25-35和IBO造成拟痴呆模型，每鼠0.3µl(A β 4µg和IBO 1µg ，溶于1µl生理盐水中) ，对照组注射等量生理盐 25-35 水。设立对照组、模型组和梓醇用药组。用药组灌服50mg/kg/d梓醇， 另两组灌服蒸馏水，共60d 。用脑冠状石蜡切片HE染色考察注射轨迹， 用药60d后进行Y-迷宫测定各组动物学习能力（主要反映短期记忆功 能），放射配基结合分析单点法测定注射侧脑内M胆碱受体密度，放 射酶学法测定脑内胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase ，ChAT ） 的活性，ELISA 法测定脑内脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor ，BDNF ）的含量。 结果 脑冠状石蜡切片HE染色显示模型小鼠注射部位与图谱脑 基底核部位基本一致。Y-迷宫实验测得造模后连续60d每天喂服梓醇 50mg/kg小鼠的学习能力，梓醇组第7天20次测试的正确次数(18.33 ± 0.98) ，显著好于模型组(16.15 ±2.30) ，与对照组(19.38 ±0.92)无统计 学差异。梓醇组第7天20次测试的正确次数/ 总反应时间(8.41 ±0.80) 也显著好于模型组(5.92 ±1.20)，且与对照组(9.18 ±0.63)无统计学差 异。放射配基结合分析单点法测定注射侧脑内M胆碱受体密度，对照 组(1090±108 fmol/mg Pro) ，模型组(925±58 fmol/mg Pro) ，梓醇组 (1121±86 fmol/mg Pro) 。对照组和梓醇组M受体密度均显著高于模型 组，且两者之间无统计学差异。M受体密度与迷宫实验中动物学习记 忆能力显著相关(r=0.58，P0.01) 。放射酶学法测定脑内ChAT活性， 梓醇组(18.38±3.65 nmol/h/mg Pro) ，显著高于模型组（14.80±2.46 nmol/h/mg Pro ），且与对照组（18.23±3.14 nmol/h/mg Pro）无统计 学差异。ELISA法测定脑内BDNF含量结果显示，与模型组（0.733 ± 0.221 pg/ug Pro ）相比，梓醇组BDNF含量显著提高（0.849 ±0.208pg/ug Pro ），且和对照组（0.832 ±0.216 pg/ug Pro ）无统计学差异。 结论 小鼠单侧脑基底核部位一次性定位注射淀粉样肽Aβ25-35 和IBO可造成稳定的拟痴呆模型，梓醇能明显改善拟痴呆小鼠的短期 记忆能力，同时能显著提高脑内M 受体密度，增加脑ChAT活性和 BDNF含量。 关键词 梓醇，拟痴呆模型，学习及短期记忆，M胆碱受体， 胆碱乙酰转移酶，脑源性神经营养因子 A Mouse Dementia Model Established by Intracranial Injection of Aβ Plus Ibotenic Acid and 25-35 the Preliminary Pharmacological Study of Catapol