hif-1α反寡核苷酸对宫颈癌hela细胞生长的抑制作用及hif-1α、vegf表达的影响.pdfVIP

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致 谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 逖 签字日期： 俎年生月监Et 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、 使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机 构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授 权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。 论文作者签名： 指导教师签名： 签字日期：丝!互年生月笪日 HIF．1a反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞生长的 抑制作用及HIF．1a、VEGF表达的影响 硕士研究生：于海华 指导教师：韩 璐 教授 专业名称：妇产科学 摘 要 背景：近年来，反义技术广泛地应用于肿瘤基因治疗的研究中，随着基因组 学、蛋白组学的研究，已筛选出部分在肿瘤转化、发展过程中的靶基因可作为治 疗的靶标。有学者发现，缺氧诱导因子．1a(HIF．1a)是介导肿瘤细胞缺氧适应 的关键性转录调控因子，在多种恶性实体瘤中高表达。HIF．1a可调节多种靶基因 的能量代谢，影响新血管的生成，促进肿瘤的增殖和转移。血管内皮生长因子 (VEGF)在内皮生长及肿瘤发生中具有重要作用，肿瘤的生长和扩散转移与血 管生成密切相关。因此，HIF．1a可能是肿瘤基因治疗中一个极具潜力的靶点。 目的：应用HIF—l Hela细胞，研究反义脱氧寡核苷酸封闭HIF一1Q基因对体外宫颈癌Hela细胞生长 d的妇 的抑制作用及对HIF．1d、VEGF表达的影响，力求为今后进行针对HIF．1 科肿瘤基因治疗探寻一条新的可行途径。 方法： n反义脱氧寡 1、对体外培养的宫颈癌Hela细胞进行转染。实验分为HIF一1 n正义脱氧寡核苷酸(SODN)组、脂质体对照组及空白 核苷酸(ASODN)组、HIF．1 对照组。 a 2、采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法，检测HIF一1 细胞株增殖的影响。 Q和VEGF的表达。 对照组细胞HIF．1 mRNA Q和VEGF 4、逆转录一聚合酶链反应(RT—PeR)检测各组细胞HIF—l 的表达。 了解HIF-la基因的沉默效果。 6、所得数据应用SPSSll．5统计分析软件进行分析。 结果： 抑制作用增强。 2、RT．PCR及Western blot结果显示， 因表达与SODN组、脂质体对照组及空白对照组比较，表达量明显降低，差异有 用提供了实验依据。