人骨髓间充质干胞抑制t淋巴细胞增殖及il-10、ifn-γ、lfa-1mrna表达的实验研究.pdf

i≯C‘‘=：’ Y1779407 目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………5 研究论文 人骨髓间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖及IL．10、IFN．Y、 LFA．1 mRNA表达的实验研究 前言………………………………0刖舌……………………………… 0……………………………………··1………………”……………………J0一 材料与方法………………………………………………………………·10 结果…………………………………………………………………………·16 附图…………………………………………………………………………·18 附表…………………………………………………………………………··21 讨论…………………………………………………………………………··23 结论…………………………………………………………………………··28 参考文献……………………………………………………………………28 综述 间充质干细胞的免疫调节功能………………………………30 致谢……………………………………………………………………··39 个人简历………………………………………………………………………·40 r——’。。。。。。。。。’———。’————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一—— 中文摘要 人骨髓间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖及IL．10， mRNA表达的实验研究 IFN—Y，LFA一1 摘 要 目的： marrow stemcells， 研究表明骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stemcells disease， 清楚。 本实验以植物血凝素(PHA)刺激人外周血淋巴细胞作为反应体系， 观察人BM．MSCs与人外周血T淋巴细胞接触和非接触培养时活化的 平表达，初步探讨其机制，为今后BM．MSCs的临床应用提供实验依据。 方法： 1人BMMSCs的培养、扩增和鉴定 取营养性贫血患者骨髓液10ml，Ficoll分离液分离后取中间细胞 种于25cm2培养瓶中，置于37℃、体积分数为5％C02培养箱中培养， 48 h换液一次，后每2．3天换液1次。融合达80％．90％时，胰酶消化， 继续传代培养。取传至第3代MSCs，消化离心收集细胞制成悬液。流 式细胞仪检测细胞CD34、CD45、CD44表面抗原表达。 2人外周血T淋巴细胞的分离、检测、鉴定 取河北省血液中心提供的健康志愿献血者外周血白细胞滤器，用 生理盐水反冲滤器获得血细胞悬液，Ficoll分离液分离提取单个核细 胞，NH4CL溶液裂解红细胞，尼龙棉柱分离纯化T淋巴细胞，台盼蓝 染色测细胞存活率，流式细胞术检测CD3表达阳性率。 3MSCs与T淋巴细胞分组混合