斑蝥酸钠维生素6注射液诱导人骨肉瘤细胞mg-63凋亡及其机制的研究.pdf

中文摘要 斑蝥酸钠维生素B6注射液诱导人骨肉瘤细胞MG．63 凋亡及其机制的研究 摘 要 目的：以人成骨肉瘤细胞MG．63为研究对象，探讨斑蝥 酸钠维生素B6注射液诱导人成骨肉瘤细胞株MG．63细胞凋 亡的作用及其分子机制，为骨肉瘤的治疗提供实验基础。 养箱内按常规条件进行传代培养。待细胞进入对数生长期后 用胰蛋白酶消化成单细胞悬液后进行操作。采用以下实验： l采用四唑盐(MTn比色法检测细胞增殖，将骨肉瘤细胞接 种于96孔培养板上，贴壁后分别加入不同浓度的斑蝥酸钠维 结晶物充分溶解，在酶联免疫检测分析仪上测定OD492的 值，根据公式计算抑制率。 2形态学观察细胞接种贴壁后分别加入不同浓度的药物后 分别培养24、48、72小时后在倒置显微镜下观察细胞形态改 变并照相。 3流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞周期分布：收集不 同浓度斑蝥酸钠维生素B6注射液处理24／J,时后培养细胞的 MG一63及对照组细胞，冷PBS漂洗。预冷70％乙醇4。C，固定， 上机检测前离心去固定夜，O．5％胃蛋白酶消化，碘化丙锭室 温避光染色，流式细胞仪上机检测，应用软件进行分析。