大鼠门脉系统不同血供对肝再生的影响__--__辅助肝移植治疗门静脉血供方式的探讨.pdf

福建医科大学博士论文 大鼠门脉系统不同血供对肝再生的影响 ——辅助肝移植门静脉血供方式的探讨 中文摘要 背景及目的 辅助肝移植是一种治疗急性肝功能衰竭拥有良好前景的手段，其具有保留原肝再生 机会、可能避免免疫抑制剂的长期应用等优点。然而，辅助肝如何重建门静脉系统的血 流一直存在争议，通常应用的是供体门静脉与受体门静脉主干的端侧吻合。然而，其存 在门静脉血流竞争、吻合口血栓发生机率高等问题。为了不干扰宿主肝脏的门静脉血供， 近年有学者提出辅助肝脏门静脉动脉化或者左肾静脉化，并有零星的个案报道。究竟辅 助肝移植门静脉的血供采用何种方式更为合理，值得深入研究。本研究观察SD 大鼠90% 肝切除诱导急性肝功能衰竭时，不同门静脉血内毒素水平的变化，了解肠源性内毒素的 入血途径；探讨同一大鼠体内门静脉分支接受不同血流（门静脉血、动脉血）对肝脏再 生的影响，明确肠腔分流及门静脉动脉化辅助肝在肝切除急肝衰中的意义；论证肠系膜 静脉供血的辅助肝移植治疗急性肝功能衰竭的可行性。 方 法 1. 建立90%肝切除诱导急性肝功能衰竭大鼠模型，并以70%肝切除和假手术为对照， 观察术后大鼠生存情况，不同时间点（6h、12h、18h、24h ）肝功能、血氨及TNF-α 变化；不同部位血液（肠系膜静脉血、脾静脉血和外周血）内毒素水平；肝脏及肠 道组织病理改变。 2. 建立半肝门静脉动脉化大鼠模型，并设立全肝门静脉动脉化及假手术作为对照，对 比观察术后不同时间点（3d、7d、2w ）肝功能、血氨，不同肝叶重量，肝脏病理， 投射电镜，以及肝细胞Ki67 和Caspase-3 免疫组化染色结果。 3. 建立模拟 95%肝切除+半肝门静脉动脉化+肠腔分流(95%PH+ HPVA+MCS) 的大鼠 模型，并以95%肝切除(95%PH)、95%肝切除+肠腔分流(95%PH+MCS) 以及模拟95% 肝切除+半肝门静脉动脉化(95%PH+ HPVA)大鼠作为对照。观察术后大鼠生存情况， 不同时间点肝功能、血氨、内毒素水平，不同肝叶重量，肝脏病理，以及肝细胞 Ki67 免疫组化染色结果。 5 福建医科大学博士论文 4. 建立肠系膜静脉供血的辅助肝移植(ALT-MVBS)大鼠模型，并以90%肝切除大鼠作 为对照，观察术后大鼠生存情况；宿主肝脏和辅助肝脏的重量变化及病理转归。 5. 统计学处理：应用SPSS16.0 软件进行单因素方差分析、秩和检验、生存分析等，P0.05 判定为有统计学意义。 结 果 1. 90%肝切除组大鼠在术后 28-51 小时内死亡，术后生存情况显著差于假手术组和 70%肝切除组(u = 12.746 ，P = 0.002) 。90%肝切除组术后随时间推移，血清ALT 、 AST 、ALP 、血氨均逐渐升高，而白蛋白逐渐下降。70%肝切除组术后 24h 和 90% 肝切除组术后6 h、12h，肠系膜静脉血内毒素水平显著高于脾静脉血和外周静脉血。 90%肝切除组术后随时间的推移，血清TNF-α逐步升高；肠系膜静脉、脾静脉血和 外周血内毒素水平与外周血 TNF-α 水平均具有显著的相关性（P0.001 ），其中肠 系膜静脉血的相关系数最高，达到0.933 。90%肝切除组，术后可见肝组织损害，肝 小叶结构模糊，血窦呈弥漫性或局灶性扩张，肝细胞变性、坏死，门脉区有炎性细 胞浸润。大鼠回肠粘膜固有层变薄，部分上皮细胞变性脱落，绒毛水肿增粗，排列 紊乱，高度缩短，淋巴细胞增多。 2. 半肝门静脉动脉化组、全肝门静脉动脉化组及假手术组大鼠均获得良好存活。术后 7d 和2w 时，全肝门静脉动脉化组血氨显著高于另两组。全肝门静脉动脉化术后， 大鼠各叶肝脏重量/ 鼠重与假手术组对比，均无明显变化。半肝门静脉动脉化术后， 全肝重量/ 鼠重（TLW/R