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基因表达与蛋白质纯化技术探讨 复旦大学生物化学系 黄伟达 whuang@fudan.edu.cn 2004年5月18日 内 容 基因表达体系及优劣势 大肠杆菌中表达蛋白质 可能碰到的问题 基因工程的应用领域 1.? 蛋白质功能研究 2. 生物制药和疫苗生产 3.? 疾病的基因治疗 4.? 食品、化工用酶制剂 5.? 抗虫、抗逆植物改良 6. 细胞代谢产物的富集 基因表达体系 1.? 原核体系 2. 真核体系 大肠杆菌 (Escherichia coli) 遗传背景清楚，基因工程操作方便，商品化表达载体种类齐全，表达效率高； 基本不分泌，易形成包含体(无正确折叠的立体结构)，无加糖等修饰 枯草杆菌 (Bacillus subtilis) 分泌蛋白质能力强，一般有天然立体结构； 无加糖修饰功能，培养液中蛋白酶活性高，重组蛋白易受蛋白酶的水解； 质粒不稳定，尚无商品化的表达载体 其 他 乳酸菌 (Lactic acid bacteria) 沙门氏菌 (Salmonella typhimurium) 苏云金杆菌 (Bacillus thuringiensis) 真核细胞表达体系 酵母细胞 昆虫细胞