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2012 年 第 57 卷 第 11 期：883 ~ 890 《中国科学》杂志社 特邀论文 SCIENCE CHINA PRESS 微生物油脂花生四烯酸产生菌离子束诱变和发酵调控 * * 余增亮 , 王纪, 袁成凌, 黄青 , 冯慧云, 贡国鸿, 郑之明, 姚建铭 中国科学院和安徽省离子束生物工程学重点实验室, 中国科学院合肥物质科学研究院, 合肥 230031 * 联系人, E-mail: zlyu@; huangq@ 2011-11-02 收稿, 2012-03-06 接受 国家自然科学基金、国家“十五”科技攻关计划(2001BA302B-04)、安徽省科技攻关计划(85-722-22-01)、中国科学院知识创新工程方 向性项目(KSCXZ-SW-324)和中国科学院“百人计划”资助 摘要 某些微生物是高质量油脂的生产者. 微生物油脂不仅有益健康, 而且是生物柴油潜在 关键词 的油脂来源. 中国是个油脂资源缺乏的国家, 开发微生物源油脂具有重要的意义. 本文以产 单细胞油脂 油微生物——高山被孢霉菌为出发菌, 以单细胞油脂多不饱和脂肪酸产率为筛选目标, 采用 高山被孢霉菌 二步离子束诱变-筛选的策略, 获得了高产菌株. 研究了高产菌株的营养需求, 创建了重复利 离子注入 花生四烯酸 用提油后的残体(菌粕)合成微生物油脂的技术. 针对丝状真菌高密度发酵的传能和传质问题, 3 生物柴油 研制了6×50 和4×200 m 大容量专用反应器组, 单位发酵容积生物量达38.2 g/L(发酵液)、油 脂20.67 g/L. 其中具有重要生理活性的花生四烯酸产率最高达9.89 g/L, 平均为8.97 g/L. 花 生四烯酸提取和精炼后的残油转化为生物柴油, 主要指标达到国家生物柴油标准. 在自然界, 某些富含脂类的微生物, 如酵母、真 霉菌为对象, 利用离子束诱变技术对其进行遗传性 菌、藻类等, 是高质量油脂, 特别是长链多不饱和脂 修饰. 经过 8 年的努力, 获得了具有商业化前景的 肪酸(polyunsaturated fatty acids, PUFAs) 的生产者. ARA 高产菌株[5], 并在武汉市建立生产基地进行工 微生物油脂也称单细胞油脂(single cell oils, SCO). 20 业规模的合成研究[6], 生产出国际上 ARA 含量最高 世纪, 人们试图利用单细胞油脂代替植物或动物油 的单细胞油脂[7]. Single Cell Oils 一书认为, 当人们正 脂, 但由于经济问题, 此过程进展缓慢. 1985 年世界 在寻找替代的富含 ARA 油脂的生物合成技术时, 中 上第一个利用毛霉菌(Muco rcircinelloides)工业化生 国武汉利用高山被孢霉菌的新菌株实现了工业化生 产-亚麻酸的工程也只持续了 6 年时间[1]. 此后, 少 产[8]. 数国家利用高山被孢霉菌(Mortierella alpina)进行花 在影响发酵产率的诸因素中, “种子”( 即菌种)是 生四烯酸的资源开发. 进入 21 世纪, 微藻发酵生产 第一要素. 要使菌株在代谢过程中大量地合成并积 DHA[2]和生物柴油油脂的研究逐渐发展起来. 累特定产物,