cmpds患者ak2 v617f点突变和klf4mrna表达及其相关性的研究.pdfVIP

中文摘要 cMPDs患者JAK2 mRNA表 V617F点突变和KLF4 达及其相关性的研究 摘 要 目的：随着世界上老龄人口增多，多发于高龄人群的慢 真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、慢 性特发性骨髓纤维化(CIMF)、慢性粒细胞性白血病(CML)、 慢性中性粒细胞白血病(CNL)、慢性嗜酸性粒细胞自血病 物学发病机制已明确。约90％～95％CML患者Ph染色体阳 性，即由位于9号染色体长臂的原癌基因ABL易位到22号 染色体长臂与BCR基因相融合形成BCR／ABL融合基因。Ph 酪氨酸激酶的抑制剂)治疗反应良好。ET、PV、IMF组成 主要并发症，晚期IMF患者可出现严重的全血细胞减少。三 者间可以相互转化，也可以进展为CML或急性白血病。与 CML不同，在PV、ET和IMF患者没有发现可重复性染色 体易位，也无特效治疗药物。 近年国外数个研究组报道发现了JAK2V617F基因突变。 V617F 它广泛存在于BCR／ABL阴性的cMPDs患者中。JAK2 是一种高致病性获得性基因突变，即在JAK2基因的第1849 位点发生G—T突变，导致JAK2蛋白第617位的缬氨酸被 苯丙氨酸代替，推测JAK2V617F点突变所产生的激活作用 中文摘要 是PV、ET、IMF的重要发病机制，国内未见相关报道。 另一方面，KLF4 mRNA是锌指蛋白转录因子家族的一 员，KLF4(旧称GKLF)在多种组织有表达，对控制造血 干细胞分化有重要作用。一些研究表明：KLF4mRNA在骨 髓增殖性疾病表达增高。 但JAK2V617F点突变与KLF4mRNA表达异常之间的 的关系尚未明了，KLF4mRNA表达水平对BCR／ABL阴性 的MPD疾病发展的影响等研究尚是一项空白。本研究旨在 mRNA的表达 急性白血病以及健康个体的突变情况和KLF4 情况。探讨JAK2V617F点突变和KLF4mRNA表达水平与 BC刚ABL阴性的骨髓增殖性疾病的关系，进一步揭示这组 疾病的BCR／ABL分子生物学发病机制，为开发相应的靶向 治疗药物提供理论依据。 方法： 二医院、邯郸市中心医院和衡水市哈励逊医院血液内科住院 和门诊随访的病人。本实验研究设观察组62例，包括各种 eMPDs患者：其中真性红细胞增多症(pV)26例、原发性 血小板增多症(ET)26例、慢性特发性骨髓纤维化(CIMF) 9例、慢性嗜中性粒白血病(CNL)l例，对照组包括慢性 12名健康志愿者。所有病人符合WHO2000年诊断标准，并 排除了继发性红细胞增多症、继发性血小板增多症、继发性 骨髓纤维化。 2肝素抗凝留取各组病人和健康志愿者5ml骨髓或8ml外周 中文摘要 血，提取单个核细胞放．80。C冰箱备用，集中提取各份标本的 DNA和总RNA。 mRNA的表达率和表达水平。根据BCR／ABL融合基因检测 结果，把所有患者分为BCR／ABL融合基因阳性或阴性两组。 4用AS—PCR技术检测各组JAK2V617F点突变。根据JAK2 成JAK2V617F点突变阳性、阴性两组。 5观察记录患者的临床资料，包括年龄、性别、临床症状、 体征、血象、骨髓象、骨髓病理以及治疗反应。 mRNA在 6统计学处理：采用单因素方差分析比较KLF4 MPD组、急性白血病组、慢性粒细胞白血病组与正常对照组 中的表达水平有无差异；卡方检验分析JAK2V617F点突变 率在各组的差异。JAK2V617F基因突变阳性各组与对照组 比差异采用Fisher确切概率法比较。KLF4mRNA在PV组、