反义p38α基转染对缺氧、牵张与烧伤血清复合处理心肌细胞的保护作用及其机制研究.pdf

摘 要 第一章含大鼠反义p38d基因腺病毒载体的构建及鉴定 目的 构建大鼠反义p38Q基因腺病毒载体。 Q 方法用RT—PcR法扩增大鼠p38cDNA片段，连接到pTz57R载 I和HindIII双酶切鉴定携带反义p38 组质粒，将重组质粒pAdtrack—cmv—asp38Q酶切后所获得的反向p38 p38 Q。将获得的含目的基因片段的重组 Q的重组腺病毒pAd—asp38 腺病毒通过脂质体包裹方法转入293包装细胞内进行包装，最后将 pAd—asp38Q腺病毒经PcR法鉴定与氯化铯密度梯度离心法纯化。 结果经PcR法鉴定，成功构建大鼠反义p38Q腺病毒载体。 Q 结论用RT—PcR法扩增大鼠p38 cDNA片段，再与pTz57R等质 Q腺病毒载