第四章微生物反应器操作资料.ppt

反复流加式操作 反复流加式操作是指流加操作完成后，不全部取出反应物料，剩余部分重新加入一定量的基质，再按照流加操作方式进行，反复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图4-1d所示。 3、多级连续培养 多级连续培养系统是一具有n个串联反应器的连续反应系统。底物流经这一系统的流量为F，由物料衡算可得出菌体X、产物P及限制性基质S的衡算式。这些方程式成立的基本条件是，限制性基质由n-1号反应器流入n号反应器中立即与n号反应器内的反应物料充分混合均匀。其有关衡算式为 稳定状态下，以上三式左边为零。因此，有 从以上式子可以分析得出，从第二级开始，菌体的比生长速率不再与稀释率相等。另外，有关具有反馈的多级连续培养操作方程可采用前面所述方法推导出来。 2、具有反馈的单级连续培养 有时为了增加反应器内的菌体浓度，或者在某种条件下提高发酵产物的产率，对于单级连续培养可以采取将反应器排出液中的部分微生物重新返回反应器中。图4-9表示具有反馈的单级连续培养系统，图中g为微生物的浓缩系数（>1），r为再循反应液的比例（返回的反应液与供给的新鲜反应液的体积比）。稳定状态时，菌体的物料衡算式为 整理得 由此求得稀释率为 在这种情况下，D为“外部”稀释率，对于反应器本身，还要用一个“内部”稀释率D’的概念，它等于D加上rD， 反馈过程中，必须满足g>1,r>0这样 因此函数值 大于，即 由于的绝对值必须小于1，因此，r和g在一定范围内是互相依存的，不能任意选定。 具有反馈的单级或多级连续培养中，稳态下的稀释率都高于比生长速率。这与常规单级连续培养（保持）不同。前者流入反应器的培养液体积要相对多一些。这一方法在生物法废水处理过程之一的活性污泥法中普遍采用，因为其有利于提高除污能力。 理论上，反馈操作使菌体产率增大，但实际运用并不尽然。反应液中菌体的浓度取决于收率和底物消耗的数量，即 因此，无其它限制因子时，微生物菌体浓度在一定范围内受底物浓度的制约。如果采用控制底物浓度的方法来控制菌体浓度，可使无反馈反应系统中的菌体浓度达到反馈条件时的菌体浓度的同样数值，此时，反馈对于提高菌体产率并不显示优越性。相反，由于分离后反应液中菌体浓度降低，对菌体生产（如面包酵母生产）反而不利。 对于具有反馈的单级系统来讲，还要考虑排出反应液中菌体的浓度。菌体分离装置处的菌体恒算式为 所以， 即菌体产率等于比生长速率与的乘积。 由于具有反馈时的大于无反馈时的，因此，反馈使反应器的产率增加了倍。 所以，从菌体分离装置处流出的菌体浓度为 固定化细胞连续培养 细胞固定化就是通过包埋法、微胶囊化、吸附法等手段，将微生物细胞限制在载体的内部或表面。 固定化细胞培养与游离细胞培养相比，有以下一些优势：①固定化可提供较高的细胞密度；②固定化减少了细胞的流失，使细胞可以反复利用；③固定化可以提供对细胞有利的微环境；④可以保护某些细胞免受剪切损伤； ⑤简化了下游的细胞分离步骤。 固定化载体常常易碎，且固定的细胞容易脱落等原因的存在，固定化细胞培养器中的剪切力也不宜过高，一般采用填充柱、流动床或气升式反应器。机械搅拌式反应器只适用于载体牢固、不易脱落的固定化细胞。通常是将固定化细胞装在反应器内，一端流入培养基，另一端放出发酵液，而固定化微生物细胞始终停留在反应器内。 其他培养方法 1、双菌或者多菌培养 现代发酵工业以纯种发酵为主，而传统的固态白酒和酱油的发酵都是多菌培养发酵的结果。在自然界微生物之间的共生与互生关系也是双菌与多菌共同生存的常例，这种关系反映了微生物存在着代谢”接力棒”的依赖状态，能相互改善生存条件。 双菌发酵：维生素C的二步法 ▲采用欧文氏菌和棒状杆菌进行串联发酵，先将厂葡萄糖转化成2，5-二酮基葡萄糖酸．再进一步转化产牛2-酮某古龙酸。 ▲以山梨醇作为发酵的主要原料，利用生黑葡萄糖酸杆菌或弱氧醋酸杆菌先进行第 一步发酵，所生成的 山梨糖80℃加热几分钟后再加入灭菌的辅料（玉米浆，尿素及无机盐等），开始第二步的混合菌株发酵。当作为伴生菌的芽孢杆菌开始形成芽孢时，产酸菌株开始产酸。 淀粉---酒精的双菌发酵 用固定化的混合菌种将淀粉原料转化成乙醇。用海藻酸钠包埋黑曲霉和运动发酵单胞菌，形成固定化细胞小球。黑曲霉好氧，故长在小球表层，运动发酵单胞菌厌氧，生长在小球中间。当淀粉液流过固定化细胞反应器时，表层的黑曲霉将淀粉分解成葡萄糖并进入小球内层，运动发酵单胞菌随即将葡萄糖转化成乙醇。 许多发酵是纯菌株无法实现的．只有混合菌株才能完成．所以采用混菌培养有可能获得新型的或优质的发酵产品，有时比单菌培养更快、更有效．更简便．当然混菌培养的反应机制较复杂。 2 生物反应