葡萄糖、tnfα、il-1β对人脐静脉内皮细胞蛋白c受体表达影响的研究.pdfVIP

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葡萄糖、tnfα、il-1β对人脐静脉内皮细胞蛋白c受体表达影响的研究

葡萄糖、TNF-n、ILlB对人脐静脉内皮细胞蛋白c受体表达影响的研究 中文摘要 中 文提要 目的研究高糖、TNF.a和IL—l mRNA表达的影响,以及曲格列酮对高糖造成的内皮细胞EPCRmRNA表达下调 的影响。 方法通过体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),待细胞呈对数生长期, B和曲格列酮的培养基孵育ECV304细胞, 表达。分别以含高糖、TNF.a、IL一1 EPCR PCR技术测定ECV304mRNA的 行剂量和时间依赖性实验。采用real.time 表达。 时EPCRmRNA的表达;同时以D一葡萄糖浓度为50mmol/L的低血清(含3%小牛血 24h)时EPCRmRNA的表达。以相同时间的不加刺激剂组为对照。 mRNA 养ECV304细胞,观察不同时间点(1h、3h、6h、12h)时EPCRmRNA的表达。以 相同时间的不加刺激剂组为对照。 干预三:ECV304细胞用含IL.1B的低血清(含3%小牛血清)RPMI一1640培养 mRNA的表 13 达;同时以含IL.1 ECv304细胞,观察不同时间点(O.5h、3h、6h、12h)时EPCRmRNA的表达。以 相同时间的不加刺激剂组为对照。 葡萄糖的新鲜低血清(含3%小牛血清)RPMI一1640培养基中孵育至24h。同时以相 同时间的不加刺激剂组为空白对照,以相同时间含50mmol/L葡萄糖的低血清(含 葡萄糖、TNF-n、II广l0对人脐静脉内皮细胞蛋白C受体表达影响的研究 中文摘要 3%小牛血清)RPMI一1640培养基培养24h组为阳性对照。观察不同处理情况下 ECV304细胞EPCRmRNA的表达。 结果1.不同浓度D一葡萄糖孵育ECV304细胞24h,在D.葡萄糖浓度分别为5、 10、30、50retool/L时其EPCR (与空白对照组比);以含50mmol/LD一葡萄糖的培养基分别孵育ECV304细胞 (与空白对照组比)。 %(P0.01)、 含10ng/ml mRNA 3.不同浓度IL.113孵育ECV304细胞12h,在IL.1 B浓度分别达5ng/ml、 10ng/111l、20ng/ml时EPCR %(P0.01)、 IL一1 mRNA 含10ng/mlB的培养基分别孵育ECV304细胞0.5、3、6、12h,其EPCR %(P0.05)和(32.94:k0.93)%(P0.01)(与空白对照组比)。 4.以不同浓度的曲格列酮预处理ECV304细胞6h,曲格列酮浓度分别为 D.葡萄糖的培养基孵 5pmol/L、10p.mol/L、20p.mol/L,然后换新鲜的含50mmol/L 育ECV304细胞至24h。同时以相同时间的不加刺激剂组为空白对照,以相同时间 的含50mmol/LD.葡萄糖的培养基培养细胞24h组为阳性对照组。其中阳性对照组 EPCR mRNA的表达为(65.503:0.81)%,曲格列酮浓度分别为5 1amol/L、109mol/L、 mRNA的表达分别为(72.82--k0.46)%、 20umol/L预处理ECV304细胞6h后EPCR (82.60-2:0

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