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葡萄糖、tnfα、il-1β对人脐静脉内皮细胞蛋白c受体表达影响的研究
葡萄糖、TNF-n、ILlB对人脐静脉内皮细胞蛋白c受体表达影响的研究 中文摘要
中 文提要
目的研究高糖、TNF.a和IL—l
mRNA表达的影响,以及曲格列酮对高糖造成的内皮细胞EPCRmRNA表达下调
的影响。
方法通过体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),待细胞呈对数生长期,
B和曲格列酮的培养基孵育ECV304细胞,
表达。分别以含高糖、TNF.a、IL一1
EPCR
PCR技术测定ECV304mRNA的
行剂量和时间依赖性实验。采用real.time
表达。
时EPCRmRNA的表达;同时以D一葡萄糖浓度为50mmol/L的低血清(含3%小牛血
24h)时EPCRmRNA的表达。以相同时间的不加刺激剂组为对照。
mRNA
养ECV304细胞,观察不同时间点(1h、3h、6h、12h)时EPCRmRNA的表达。以
相同时间的不加刺激剂组为对照。
干预三:ECV304细胞用含IL.1B的低血清(含3%小牛血清)RPMI一1640培养
mRNA的表
13
达;同时以含IL.1
ECv304细胞,观察不同时间点(O.5h、3h、6h、12h)时EPCRmRNA的表达。以
相同时间的不加刺激剂组为对照。
葡萄糖的新鲜低血清(含3%小牛血清)RPMI一1640培养基中孵育至24h。同时以相
同时间的不加刺激剂组为空白对照,以相同时间含50mmol/L葡萄糖的低血清(含
葡萄糖、TNF-n、II广l0对人脐静脉内皮细胞蛋白C受体表达影响的研究 中文摘要
3%小牛血清)RPMI一1640培养基培养24h组为阳性对照。观察不同处理情况下
ECV304细胞EPCRmRNA的表达。
结果1.不同浓度D一葡萄糖孵育ECV304细胞24h,在D.葡萄糖浓度分别为5、
10、30、50retool/L时其EPCR
(与空白对照组比);以含50mmol/LD一葡萄糖的培养基分别孵育ECV304细胞
(与空白对照组比)。
%(P0.01)、
含10ng/ml mRNA
3.不同浓度IL.113孵育ECV304细胞12h,在IL.1
B浓度分别达5ng/ml、
10ng/111l、20ng/ml时EPCR
%(P0.01)、
IL一1 mRNA
含10ng/mlB的培养基分别孵育ECV304细胞0.5、3、6、12h,其EPCR
%(P0.05)和(32.94:k0.93)%(P0.01)(与空白对照组比)。
4.以不同浓度的曲格列酮预处理ECV304细胞6h,曲格列酮浓度分别为
D.葡萄糖的培养基孵
5pmol/L、10p.mol/L、20p.mol/L,然后换新鲜的含50mmol/L
育ECV304细胞至24h。同时以相同时间的不加刺激剂组为空白对照,以相同时间
的含50mmol/LD.葡萄糖的培养基培养细胞24h组为阳性对照组。其中阳性对照组
EPCR
mRNA的表达为(65.503:0.81)%,曲格列酮浓度分别为5
1amol/L、109mol/L、
mRNA的表达分别为(72.82--k0.46)%、
20umol/L预处理ECV304细胞6h后EPCR
(82.60-2:0
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