胃癌中肿瘤相关因启动子cpg岛甲基化及tgfβsmad信号传导系统表达的初步研究.pdf

置瘗虫旦生疽扭羞基固启动王垒鱼璺卫基化丞卫Q￡§碴婴鲤信量篮昱丕蕴垂达啦翅垄婴荭 第一部分 肿瘤相关基因启动子CpG岛甲基化与胃癌相关性的研究 中文摘要 实验目的：胃癌在世界范围内是发病率、死亡率最高的恶性肿瘤之一。目前胃 癌发生机制的研究主要集中于分子和细胞生物学水平，包括抑癌基因在内的相关 基因的失活在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。基因的失活方式有很多， 其中，启动子CDG岛的异常甲基化受到越来越多的重视。最近的研究证实启动子 CDG岛甲基化可能在胃癌发生、发展过程中都发挥重要作用，并且是导致抑癌基 因失活的重要机制。本实验通过检测10个肿瘤相关基因启动子CpG岛甲基化在 94例胃癌癌组织和癌旁组织中的发生率，探讨上述基因的甲基化与性别、年龄、 肿瘤位置、淋巴结转移、细胞分化程度厦PTN^f临床分期的关系，建立胃癌较为完 整的相关基因甲基化谱，为临床早期诊断胃癌提供理论依据。 实验方法：应用酚／氯仿法按常规抽提组织的基因组DNA，经过亚硫酸盐处理，应 用甲基化特异的PCR(methylation—specificPCR，MSP)方法检测94例胃癌癌组 织、癌旁组织胃粘膜10个基因的甲基化发生率。将部分PER产物回收，应用腺病 毒载体构建重组体导入大肠杆菌中，培养后