第38章 蛋白质合成及其转运.docVIP

第三十八章 蛋白质合成及转运 第一节 蛋白质合成的分子体系 一．mRNA 是蛋白质合成的模板（见上一章） 二．tRNA 转运活化的氨基酸至mRNA 模板上 1957 年Hoagland，M.B.发现一类稳定的RNA 小分子，不与核糖体结合，因而不同于mRNA 和rRNA。 Crick, F.比较了核酸和氨基酸的大小和形状后，认为不可能在空间上互补，因此预测：存在一类分子转换器，使信息从核酸序列转换成氨基酸序列；这种分子很可能是核酸；它不论以何种方式进入蛋白质翻译系统的模板，都必须与模板形成氢键（即配对）；有20 种分子转换器，每种氨基酸一个；每种氨基酸必定还有一个对应的酶，催化与特定的分子转换器结合。 1963 年，Ehrenstein 等人用实验证明了Hoagland 发现的分子就是Crick 预言的分子转换器，即tRNA。 三．核糖体是蛋白质合成的工厂 早在本世纪30 年代后期就发现细胞质和细胞核中都有核酸存在，不过用1924 年福尔根发明的染色法只能使细胞核中的核酸染色。但两种核酸在260nm 的吸收非常相似。1941 年，细胞学家J.Brachet 和T.Caspersor 注意到细胞质中的核酸与蛋白质的合成有密切的关系。50 年代有人用电子显微镜和物理化学手段发现大肠杆菌细胞质的RNA 常常存在于蛋白质合成相关的颗粒中（?20nm，用35S 进行脉冲式标记的实 验证明该颗粒是蛋白质合成的所在地），简称核糖体。 核糖体得到分离后，发现含有RNA，即称rRNA。Watson 等发现rRNA 的G≠C，A≠U，断定是一单链分子。 大肠杆菌的7 种核糖体RNA 的操纵子： 16S rRNA 在 30S 核糖体亚基中： 大肠杆菌核糖体的三维结构： 第二节 翻译的步骤 一．氨酰-tRNA 合成酶使氨基酸结合到特定的tRNA 上 二．每一个氨酰-tRNA 合成酶可识别一个特定的氨基酸和与此氨基酸对应的tRNA 的特定部位 两类氨酰-tRNA 合酶的结构成镜像关系，分别与tRNA 的两侧结合，图中可见其空间互补关系。 氨酰-tRNA 合成酶的辨认位点： 4 种tRNA 的辨认核苷酸： 大肠杆菌的氨酰-tRNAGln 合成酶的晶体结构。大肠杆菌的氨酰-tRNAGln 合成酶的图解，紫色球代表磷原子。 大肠杆菌tRNAAla 氨基酸臂是酶的辨认位点。 3:70 碱基对的多种可能结构： 碱基对的多种变化。在不同的碱基配对中位置有明显变化。 三．一个特殊的tRNA 启动了蛋白质的合成 四．翻译开始于mRNA 与核糖体的结合 大肠杆菌核糖体辨认的多种SD 序列： 五．蛋白质因子帮助蛋白质合成的起始 GDPCP 作为GTP 的类似物，抑制GTP 参与的步骤。 六．在氨基酸的掺人过程中有4 个重复的延伸反应 转肽反应： 23S rRNA 肽基转移酶活性部位的序列。绿色为非保守核苷酸，在三级结构中肽酰-tRNA 转移到中心部位。 七．核糖体反应中GTP 的作用：肽链合成延伸反应中的进位和移位 在A/P，E/P 等符号中，分子部分代表其位置在50S 亚基，分母部分代表其位置在30S 亚基。 2 个tRNA(L 形管状)在延伸反应中的位置：tRNA 的反密码环指向小亚基的裂缝(mRNA 从此处穿过)，氨基酸臂相互靠近，在蛋白质合成过程中，tRNA 既可绕氨基酸臂旋转，也可绕反密码臂旋转。黄色区域是氨酰-tRNA 和延伸因子进入的位置。 EF-Tu 和EF-G 的结构：EF-Tu 的三个结构域分别用红，绿和淡蓝色表示，淡紫色表示。tRNAEF-G-tRNA的结构与EF-Tu-tRNA 相似，二者竞争核糖体上的同一个结合部位。 八．翻译的终止需要释放因子和终止密码子的参加 RF1 识别UAA 和UAG，RF2 识别UAA 和UGA，RF3 协助二者起作用。 核糖体循环： 多聚核糖体的电镜照片： 原核生物的转录翻译同步进行： 色氨酸操纵子可以表达多种蛋白质： 第三节 真核生物肽链的合成 真核生物mRNA 的结构： 真核生物肽链合成的起始分为3 个阶段。 eIF4G 是结合eIF4E:帽子复合物的多功能接头polyA 结合蛋白： 在真核生物中，促进氨酰-tRNA 进位的延伸因子只有一种EFT1，促进移位的为EFT2，真核生物的肽链合成终止只需要一种终止因子RF。eIF-2 活性的调节： 合成的抑制剂：四环素族（金霉素、新霉素、土霉素）：作用于30S 和40S 亚基，阻碍tRNA 与小亚基结合，易进入细菌，不易进入哺乳类细胞；链霉素、新霉素、卡那霉素：作用于30S 亚基，抑制启动，造成误译等；氯霉素、林可霉素、红霉素：作用于50S 亚基，抑制转肽酶，妨碍移位等；白喉毒素修饰EFT2 的氨基酸，强烈抑制真核生物蛋白质的合成；蓖麻蛋白的B 链与细胞结合，使A 链进入