基因芯片在急性巴细胞白血病患儿临床应用的研究.pdf

基因芯片在急性淋巴细胞白血病患JLfl【缶床应用的研究 中文摘要 基因芯片在急性淋巴细胞白血病患儿 临床应用的研究 中文摘要 目的： 应用基因芯片技术对ALL患儿的基因表达谱进行初步研究，寻找与ALL早期诊 断分型、治疗及预后判断等具有重要价值的新基因；并通过实时定量RT-PCR方法对 差异性基因进行验证，发现基因与疾病的关系，对临床治疗起指导意义。 方法： 1． 患儿与3例初诊和再评估均为标危(A组)的ALL患儿作为实验组，及3例ITP 患者作为正常对照组；分离骨髓单个核细胞，提取总IⅢA；合成cDNA，反转 录cRNA后与IlluminaHuman一6全基因组表达谱微珠芯片杂交。洗片后用 Illumina BeadSafion基因芯片扫描仪进行杂交结果扫描，芯片图像分析软件 BeadStudio对芯片数据分析，比较B组和A组两者的差异性基因。 2． 选取82例ALL患儿作为实验组和15例正常患儿作为对照组，应用实时定量 RT-PCR方法对ABCC4、BCLllA和TOP2A3个差异性基因进行定量分析，并 分析这3个目的基因在实验组与对照组之间差异性表达的意义及与临床指标的 关系。 结果： 1． 等14个上调基因和TOP2A等5个下调基因。 ②研究表明ABCC4和TOP2A为两个多药耐药基因，BCLl1A为一个与血液系统恶 性疾病致病机制可能有关的基因，其余基因与血液系统恶性疾病的相关性尚待研 究。 ③差异性基因功能聚类分析发现其与凋亡、细胞粘附、细胞信号、细胞分化、细 基因芯片在急性淋巴细胞白血病患儿临床应用的研究 中文摘要 胞骨架结构形成、代谢过程等相关。 标危组，差异有统计学意义忱O．05)；白血病患者组的表达量均高于正常对照组， 差异也有统计学意义Co0．01)。其余白血病患者组(除高危组和标危组)之间的差异 没有统计学意义。 ②下调基因TOP2A经实时定量RT-PCR验证，发现高危组的表达量低于标危组， 差异有统计学意义(p0．05)；白血病患者组的表达量均低于正常对照组，差异也 有统计学意义Coo．01)。其余白血病患者组(除高危组和标危组)之间的差异没有统 计学意义。 1A ③各临床指标间的差异对BCLlmRNA表达量均无显著性差异(尸值0．05)。各临 床指标中只有缓解和不缓解因素之间的差异对ABCC4mRNA的表达量有显著性差 异俨值O．05)；各临床指标中只有缓解和不缓解、泼尼松试验敏感与不敏感两组因 素之间的差异对TOP2A mRNA的表达量有显著性差异(P值均O．05)。 结论： 1-基因芯片技术能发现与儿童ALL相关的差异性基因，这些基因分别参与细胞凋亡、 细胞信号、细胞分化、细胞骨架结构形成及代谢过程等。 2．定量RT．PCR发现ABCC4基因为一个可用于评估临床疗效的上调耐药基因， BCLl 1A基因为一个与儿童ALL发病机制可能相关的上调基因，TOP2A基因为一 个与儿童ALL治疗靶点可能相关的下调耐药基因。 3．基因芯片技术结合定量RT．PCR对儿童ALL精确分型、预后判断、早期干预和靶向 治疗的研究等具有重要的临床应用价值。 关键词：急性淋巴细胞白血病；基因表达谱；基因芯片；实时定量RT．PCR 作 者：王均林 指导老师：柴忆欢教授 Il 基因芯片在急性淋巴细胞白血病患儿临床应用的研究 英文摘要 of ofchildren Prelimin