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植物广谱抗病基克隆及载体构建的研究,克隆载体的构建,克隆载体构建,慢病毒载体构建,过表达载体构建,腺病毒载体构建,载体构建步骤,载体构建,基因表达载体的构建,克隆载体
摘要
园林植物多进行保护地栽培,高温高湿的局部小气候使园林植物更容易感染多种病害,
而一旦染病则会严重影响园林植物的观赏价值,造成经济上的重大损失。一方面,园林植
物抗病育种周期长,能够用做抗病育种的园林植物种质资源贫乏,短时间内园林植物抗病
育种难以有所大的突破;另一方面,日益蓬勃发展的园林业迫切需要能够抵抗多种病害的
广谱抗病商品植株。
resistance,SAR)是植物抵御病原菌侵染的最有效
系统获得性抗性(Systematicacquired
手段,我们可以利用SAR信号传导途径中的关键功能基因来启动园林植物自然防御系统,
达到广谱抗病的目的。NPRI基因在植物的SAR发生中起着重要的作用,通过NPRl基因
的过量表达可以诱导植物SAR的起始,使植物产生对多种病原菌的广谱抗病性。TGA2转
录因子能直接和多个病程相关基因启动子结合感应SA的调节元件结合,能够增强病程相
关蛋白的表达水平,特异的诱导植物产生SAR,从而启动植物的广谱抗病。
本研究主要研究成果如下:
1. 通过反转录PCR,从拟南芥中克隆出广谱抗病基因NPRl。测序结果显示所克隆
NPRI基因全长1782bp,与NCBI所登陆的基因100%同源。
2. 通过反转录PCR,从拟南芥中克隆出能够诱导广谱抗病的TGA2转录因子。测序
碱基的置换,但所翻译氨基酸没有变化。
3.
p35ST-NPRl植物表达载体。
4.
建出p35ST-TGA2植物表达载体。
5.
表达载体。
6.
蛋白表达载体。
关键词:园林植物;广谱抗病:NPRI;TGA2:载体构建;
Reseashabout and Vector
AmplificationExpressing
ConstructionofPlant
Broad-spectrum
Disease.resistanceGene
Abstract
11le arecultivatedinthe whereare tocause
horticulture
plantsusually greenroom easy
bacterialand diseases.0acewereinfectedtheallkindsof
many fungnl by diseases,the
horticulture ofviewandadmirewas affectedandthe valuewas
plants’value seriously economy
reduced.
seriously
isthe in resistanceto
mosteffective
Systematicacquiredresistance(SARl way plant
the in
keygenesystematicacquiredresistance(SAR)signaltransduction,we
pathogens.Using
canintrodutedthe owndisease-resistancewhiehcan a disease
plants gainbroad-spectrum
resistance.NPRIan roleinthe
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