新生大鼠缺氧缺性脑损伤脑组织水通道蛋白-4的表达与神经细胞凋亡.pdfVIP

·中文结构式摘要· 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织AQP．4的表 达与神经细胞凋亡 目 的 缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的发病机制是复杂的，随着对HIBD发病机制的进一 步认识，HIBD后迟发性神经元死亡的发生与细胞凋亡密切相关。由于凋亡进展缓 慢而且可逆，为治疗HIBD提供了时间窗。脑组织水通道蛋白．4(Aquaporin．4， AQP-4)在围产期新生儿窒息中的作用还不十分清楚，本研究亦在探讨HIBD时 AQP．4的表达及其与脑细胞凋亡的关系。 方法 组根据处死时问不同又分为2个亚组：1d组、3d组，每亚组各10只。实验组新生大 鼠采用结扎左侧颈总动脉后置于含8％浓度氧的低氧环境中24,时制备而成；对照 组新生大鼠仅分离颈动脉，未结扎及缺氧。两组均于造模后1d、3d留取其脑组织， 采用HE染色、电镜、免疫组织化学检测脑组织AQP．4表达及脑细胞凋亡情况。采 用SPSSl6．0软件进行分析。 挂 毋 ：日 木 1、行为能力改变：缺氧缺血后新生大鼠出现不同程度的行为异常，如自发左 旋，逐渐失去平衡能力，部分鼠出现抽搐，尿、便失禁，嗜睡或昏睡状态，有的 昏迷； 2、HE染色和电镜：--者结果均证实，新生大鼠HIBD时凋亡是神经细胞主要的 死亡形式，与坏死共存，且凋亡的发生先于坏死；凋亡的细胞主要位于选择性细 胞死亡区、病变较轻的丘脑和海马CA2／CA3区域、病变较重的皮质和纹状体边 缘内带；而坏死的细胞主要位于病变较重的皮质和纹状体的中心。HE染色显示 缺氧缺血组大鼠大脑皮质出现局灶性神经元核固缩，核碎裂，核仁偏位或消失， 胶质细胞增生，基质疏松；电镜可更加清晰、细致的观察细胞凋亡的改变，明确 区别正常神经细胞，早、中、晚期凋亡细胞及坏死细胞。 3、免疫组织化学染色：缺氧缺血组新生大鼠脑组织AQP．4表达较对照组明显 增加，实验组脑细胞胞浆内可见大量棕黄色颗粒沉着，而对照组仅在脑实质血管 周围，星形胶质细胞可见少量棕黄色颗粒，对照组脑组织的AQP．4的免疫组化平 均OD值(0．23+0．05)低于实验组(HIBD后1d 0．27+0．03)， 0．25+0．03；HIBD后3d 差异有统计学意义(P0．05)。 结论 1、HE染色、免疫组化及透射电镜均证实新生大鼠HIBD时凋亡是神经细胞 主要的死亡形式、与坏死共存，凋亡先于坏死。凋亡的细胞主要位于选择性细 胞死亡区、病变较轻的丘脑和海马CA2／CA3区域、病变较重的皮质和纹状体边 缘内带；而坏死的细胞主要位于病变较重的皮质和纹状体的中心。迟发性的细 胞凋亡是加重及扩展病损区的一个因素。 2、AQP-4在缺氧缺血时明显表达，表明AQP．4可能参与THIBD的发病过程， AQP．4出现在凋亡细胞较多的部位，表明可能与脑细胞凋亡密切相关。 关键词 水通道蛋白．4；缺氧缺血性脑损伤；脑缺氧；脑缺血；大鼠；新生儿；细胞 凋亡 2 ·英文结构式摘要· of inneonatalratswith AQP--4 Expression ’‘ iseh, brain and of cimehesi-cixdamageopyhfaoootosiso— hypoxic ‘dam：g,and neuronalcell ective