植物的快繁与脱毒培养要点.ppt

第四章植物快速繁殖及脱毒和应用 一，植物快速繁殖 即应用组织培养技术,快速繁殖名优新品种,使其在较短时间内繁衍较多的植株,快速繁殖珍稀濒危植物,使物种得以保存的技术. 一，植物快速繁殖的途径和方法 1.外植体（不定芽）---出芽（不定芽）（直接再生） 2.外植体（毛地黄叶片）--愈伤组织—再生植株 5.外植体（叶片等）--原球茎---再生植株（兰科植物） 8.外植体—孢子—小植株（蕨类植物） 3.继代培养(Subculture) 当初代培养的试管苗在瓶内长到满瓶,或培养基养分利用完时就要转瓶,进行继代培养。 驯化现象:植物组织经长期继代培养,发生一些变化,开始继代培养要加入生长调节物质,其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长.这种现象称为“驯化”(acclimation)。 例：胡萝卜薄壁组织初代培养要加入10-6 mol/LIAA才能达到最大生长量，但继代培养10代以上，则不加IAA照样得到同样的生长量。 继代培养 蝴蝶兰，蕙兰等也如此。 驯化发生的原因：可能是继代培养中细胞积累了较多的生长物质，因此逐渐减少对外源生长物质的需要。 驯化的不足：长期继代，卡德利亚兰只长芽不长根，芽多而细弱。 3 衰退现象：长期继代培养的组培材料也会逐渐衰退（recession），丧失形态发生能力（生长不良，再生能力和增殖力下降等） 衰退现象发生的影响因素： （1）植物材料：不同植物，不同品种，不同器官或不同部位的继代繁殖能力都不相同。 通常：草本植物木本植物，被子植物裸子植物，年幼材料 老年材料；胚 营养组织，胚 胚状体 愈伤组织 （2）培养基和培养条件：培养基和培养条件适当与否对继代培养影响颇大,所以常用改变培养基和培养条件来保持继代培养。 石斛兰茎尖或掖芽培养，固体培养基培养形成原球茎后，继代培养要用液体培养基进行振荡培养。 衰退现象（续） （3）继代培养次数： 影响因培养材料而异。 有些植物长期继代培养仍保持再生能力和繁殖力。 有些植物继代增加，变异频率增加，如香蕉不定芽，继代5次为2.14%；10次为4.2%；20次为100%变异。故香蕉继代培养不能超过一年。蝴蝶兰连续培养4年后，植株退化不开花。 （4）季节：有些植物材料能否继代培养与季节有关。如水仙鳞茎，六七月份休眠，生长变慢，8月休眠后，生长加快。 百合鳞片分化能力：春季秋季夏季冬季 第2节 植物快速繁殖的应用 1.大量繁殖珍稀或名贵植物 如:佛肚兰,卡特丽亚兰等工厂化育苗 2.茎尖培养脱毒及脱毒苗的培养 无菌苗 有毒苗 脱毒苗 二，（茎尖培养）脱毒及其应用 1.病毒病及其危害 2.茎尖培养脱毒的原理 3.茎尖培养脱毒的过程 4.脱毒苗的鉴定和保存 1.病毒病及其危害 脱毒（virus elimination)培养： 利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中的病毒，生产健康的无毒繁殖材料的过程。 1.2.植物病毒病及其危害 定义：由植物病毒寄生引起的病害。 症状： ①变色，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶病。 ②坏死，在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。 ③畸形，器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生长点异常分化形成丛枝或丛簇，叶片的局部细胞变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。 番茄厥叶，卷叶病毒 1.病毒病及其危害（续） （1）症状:花而不实 花叶型马铃薯病毒：退化，叶片卷缩，产量逐年下降，到PVS，PVA，PVM，PVX 卷叶型马铃薯病毒：PLRV 香蕉束顶病：叶片越来越短小，植株矮缩，叶硬直成束（毁灭性病害）.不结果或果特心,异常 柑桔黄龙病:苹果花叶病毒，番茄病毒病，葱类黄矮病，菊花斑萎病，兰花叶病，白合丛生病。 1.3病毒病对观花植物的危害(续) 正常植株: 花朵大而艳 花序的花数目多 植株健壮 地下繁殖器官多而饱满 带毒植株 花朵小而色衰 (如菊花等) 花序的花朵数少得多(如大花蕙兰) 植株矮小 地下繁殖器官少而小(如大丽菊等) 花而不实 1.病毒病的危害（续） 目前受病毒危害严重影响生产的有： 大田作物：马铃薯、甘薯、甘蔗、烟草。 蔬 菜：白菜、大蒜、葱、番茄、黄瓜、辣椒。 果 树：柑橘、苹果、草莓、香蕉。 花 卉：香石竹、各种菊花、天竹葵、紫罗兰等 危害园艺植物的病毒数目 1.4 有关病毒病的研究历史 1934,white（美） 观察烟草根系， 发现：病毒在根，茎的分布不均匀。离根尖和茎尖越近，病毒的密度越低，反之，越高。 分生组织一般无病毒，病毒在生长旺盛的部位繁殖速度慢. 1952，Morel（法）和martin，首先利用茎尖分生组织脱毒了无病毒苗，建立茎尖脱毒组