蛋白质顺序测定的策略.pdfVIP

NI! 5. Oct.. 1984 第 5 期 1984 年 10 月 有机化学 蛋白质顺序测定的策略 钱瑞卿 (中国科学院上海有机化学研究所) 摘要s 近年来蛋白质顺序测定在自动化、微量化与策略方面都有显著的进展。用 DNA 顺序分析技 术r~l 按地测应蛋白质顺序的策略已被广泛地采用，它能加快但不能代替蛋白质的顺序测应。质诽技术削 定蛋白质顺序的途径也有了可窑的突破。 EZi 效液相色谱分离lit技术的发展、限制性酶叨及各种选择性的 化学与酶的降解方法的出现，为蛋白质顺序测Æ提供了更多可选用的工具。 叙调g 蛋白质，测定。 Strategy in Protein Sequencing Qian Ruiqing Shal1 ghai lnstitute 01 Organic ChemitrJ. Academía Siníca) Abstract: Recently considerable advances have been made in the automation. the mìcrominiaturization and the strategy in protein sequencing. DNA sequencing has been widely used to determine protein sequenc四 indirectly. This method requires lesS time in analysis. but it can not replace protein sequence detèrmination. Mass spectrometry used for protein sequencing has also made encouraging progress. The development of HPLC for peptide separation. the use of limited enzymatic , and different sel民tively chemical and enzymìc degraðation have provided more selective tρols for protein sequencing. Descriptor: protein. determínation. 三十多年前Sanger 等人测定了膜岛素的 首先我们必需知道的是它的氨基酸组成， 一级结构川，并首次提出了蛋白质分子具有唯 将水解液中的氨基酸通过磺酸型离子交换树脂 一确定的氨基酸排列顺序的概念，并发展出一 柱层析分离，然后与苟三嗣试剂反应，氨基酸 整套产生肤碎片、肤的分离、氨基酸组成分析 均呈现紫色反应谱，而亚胶基的氨基酸，如脯 和末端鉴定等蛋白质一级结构测定所必需的原 氨酸与资脯氨酸则呈黄色反应谱，检出水平在 则和方法，为蛋白质化学奠定了基础。他们当 微克级。如采用荧光胶或邻苯二甲醒代替吕ij 三 时提出的测定蛋白质一级结构的一些基本策略 嗣还可提高分析的灵敏度。 至今还被人们所沿用。