第十八章 色谱分析法.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 3. 色谱流出曲线方程 实际色谱柱N值很大，为103~106，因而洗出曲线一般趋近正态分布，可近似地用正态分布函数描述溶质分布，除以流动相体积，即可导出浓度变化方程: 当V = VR = nmax△Vm，洗出色谱峰，此时溶质最大浓度Cmax,其流动相体积为VR，即为溶质保留体积： * 4. 理论塔板的计算公式 令VR –V= △V，当洗出溶质浓度C为最大浓度Cmax一半，即Cmax / C= 2时，△V用△V1/2表示： * 为了扣除死时间的影响，引入以调整保留时间tR’计算的有效理论塔板数Neff和有效理论塔板高Heff的作为柱效指标。 * 5. 塔板理论的成就和局限 塔板理论中的理论塔板数和板高按在色谱柱效评价中具有重要实用价值。 然而，色谱是一个动态过程，区别于萃取、精馏等分级过程，不可能实现溶质在两相间真正分布平衡；忽略扩散、传质、瞬间实现平衡的假设也不符合色谱过程分子运动规律。 塔板理论不能说明为何理论塔板数随流动相流速变化；色谱过程中溶质分子分布离散的原因；也未能深入探讨色谱柱结构、操作条件等对理论塔板数或塔板高度的影响，因而对色谱柱制备、操作条件优化等色谱实践的指导作用有限，而这正是色谱理论进一步发展的内在推动力。 * 18.3.3 速率理论 1. 塔板高度的统计意义 以标准差σ2 作为分子在色谱柱内离散的度量，总的分子离散度应为单位柱长离散度之和，且与柱长呈正比，即σ2 = HL。比例因子H=σ2/L，等于各独立分子离散因素之和： * 2. 速率理论方程 * 1956， van Deemter方程包括引起色谱峰扩张、板高增大的原因：涡流扩散、纵向分子扩散及传质相，包括流动相和固定相传质。 Giddings 方程： 3. 气相色谱速率理论方程 1). 涡流扩散项(A) 流动相携带溶质分子沿柱内各路径形成紊乱的涡流运动，有些分子沿较窄而直的路径以较快的速度通过色谱柱，发生分子运动超前; 而另一些分子沿较宽或弯曲的路径以较慢的速度通过色谱柱，发生分子运动滞后，导致色谱区带展宽，可以下式表示： * 2). 纵向扩散项(B/u) 亦称为分子扩散。浓差扩散是分子自发运动过程。 3).传质项(Cu) 色谱分离过程溶质在流动相和固定相之间进行质量传递。 * 4. 液相色谱速率理论方程 高效液相色谱与气相色谱速率理论方程的主要区别要归因于液体与气体性质差异。 * 5. 影响柱效的变量 1).流动相流速(u) * 2).填料粒径(dP) 涡流扩散A随dP线性下降。 3). 色谱柱温 温度影响扩散系数Ds和Dm，从而影响分子扩散和传质速率。 * 6. 折合参数板高方程 为了在同一基础上比较不同填料粒径、不同色谱方法柱性能和解释分离条件对柱效影响，Giddings首先提出用填料粒径(dp)为单位，作为归一化度量板高(H)、流动相线速(u)、柱长(L)等无量纲折合色谱参数。 定义折合板高h=H/dp，折合流速ν=u dp/Dm，折合柱长l=L/dp。其中折合流速是流动相流经一颗填料的线速度与扩散速率之比。 * 利用巳建立的h -ν关系，可指导最佳色谱参数选择。如ν = 3能获得最小h值。由3=udp/Dm=ldp2/Dm.tM，可导出最佳填料粒径关系式: * 18.4 组分分离-基本分离方程 18.4.1 分离度 分离度(Resolution)定义为相邻两组分色谱峰保留值tR2，tR1之差与两峰底W2，W1平均宽度之比，以R表示。 当R = 1，两色谱峰交叠约4%，可称为基本分离。 当R = 1.5，两色谱峰交叠约0.3%，可视为完全分离。 * 18.4.2 分离方程 当相邻峰保留值相近时，近似地W1 = W2 = W，并按 分离度与理论塔板数N的平方根呈正比。分离某”物质对”达到一定分离度需要的理论塔板数和柱长为： * 18.4.3 分离速度及影响因素 在考虑组分分离时，另一个密切相关的因素是实现分离所需时间，既分离速度。完成分离所需时间决定于迁移速率较慢的组分，既组分2的迁移线速度u2。 18.4.4 色谱柱峰容量 一定色谱操作条件下，色谱柱在一定时间能容纳达到一定分离度(R≥1)色