第十三章 色谱定性和定量分析.ppt

1、用已知物对照定性 该法是基于在一定操作条件下，各组分保留时间是一定值的原理。 具体做法： 1）分别以试样和标准物进样分析——各自的色谱图； 2）对照：如果试样中某峰的保留时间和标样中某峰重合，则可初步确定试样中含有该物质。 3）也可通过在样品中加入标准物，看试样中哪个峰增加来确定。 3. 据相对保留值 ri,s 定性： 用保留值定性要求两次进样条件完全一致，这是比较困难的。而用ri,s定性，则只要温度一定即可。 具体做法： 在样品和标准中分别加入同一种基准物 s，将样品的ri,s和标准物的ri,s相比较来确定样品中是否含有 i 组分。 ［例］乙酸正丁酯在阿皮松L柱上进行分析（柱温100℃）。由图中测得调整保留时间为：乙酸正丁酯310.0mm，正庚烷174.0 mm，正辛烷373.4 mm，求乙酸正丁酯的保留指数。 5. 双柱或多柱定性 可克服在一根柱上，不同物质可能出现相同的保留时间的情况。 6.与其它方法结合的定性分析方法: 1) 与化学方法配合进行定性分析 带有某些官能团的化合物，经一些特殊试剂处理，发生物理变化或化学反应后，其色谱峰将会消失或提前或移后，比较处理前后色谱图的差异，就可以初步辨认试样含有哪些官能团。 2)与质谱、红外光谱等仪器联用 较复杂的混合物经色谱柱分离为单组分，再利用质谱、红外光谱或核磁共振等仪器进行定性鉴定。 7.利用检测器的选择性进行定性分析 不同类型的检测器对各种组分的选择性和灵敏度不相同。 如：热导检测器对无机物和有机物都有响应，但灵敏度较低； 氢火焰离子化检测器对有机物灵敏度高，而对无机气体、水分、二硫化碳等响应很小，甚至无响应； 火焰光度检测器只对含磷、含硫的化合物有信号； 电子捕获检测器只对含有卤素、氮、氧等电负性强的组分有高的灵敏度。 利用不同检测器具有不同的选择性和灵敏度，可对未知物大致分类定性。 1.峰面积A的测量： 对称峰：峰高h与半峰宽的积： A=1.065 ? h ? W1/2 不对称峰：峰高与平均峰宽的积： A=1/2 ?h ?(W0.15+W0.85) 1）绝对校正因子 wi=fi’Ai 或 fi’= wi/Ai 通过此式可得到待测物单位峰面积对应的该物质的量 4．校正因子的应用： 在色谱分析中，将各组分的峰面积乘以相对校正因子后，就将样品中各组分的峰面积校正成相当于标准物质的峰面积。 这样一来，对于相同量的不同组分，其计算后的峰面积就是相同的了。所以就可以用峰面积来计算待测组分的含量了。 3．注意事项： 相对校正因子与待测物、基准物和检测器类型有关，与操作条件（柱温、载气流速、固定液性质、进样量）无关 基准物：热导池检测器→苯；氢焰检测器→正庚烷 以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用; 而以氮气作载气测的校正因子与两者差别大 （三）定量方法 1．归一化法 2．内标法 3．内标标准曲线法 4．外标法 1．归一化法 前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰 依据：组分含量与峰面积成正比 优点：A.简便，准确 B.定量结果与进样量、重复性无关（前提→柱子不超载）C.色谱条件略有变化对结果几乎无影响 缺点：A.所有组分必须在一定时间内都出峰 B.必须已知所有组分的校正因子 C.不适合微量组分的测定 2．内标法：一定量的纯物质作为内标物，加到试样中 以待测组分和内标物的响应信号对比定量 对内标物的要求： a．内标物须为原样品中不含组分，加入量应接近被测组分； b．内标物色谱峰位于被测组分色谱峰附近，或几个被测组分色谱峰中间，并与这些组分完全分离； c．内标物与预测组分的物理及化学性质相近； 内标法优点： 进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响 只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关 适合测定微量组分 内标法缺点： 制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子 用内标法测定环氧丙烷中的水分含量，称取0.0115 g甲醇。加到2.267 g试样中，测得水分和甲醇的色谱峰高分别为148.8和172.3 mm。水和甲醇（内标物）的相对质量校正因子分别为0.55和0.58，试计算水的质量分数。 在某色谱仪操作条件下，分析某样品中的二氯乙烷、二溴乙烷及四乙基铅三组分，并选用甲苯为内标物，甲苯与样品的配比为1：10，测定结果如下：试求各组分的百分含量。 3．内标标准曲线法（已知浓度样品对照法） 称量同样量的试样，加入恒定量的内标物 内标对比法特点： 不需要校正因子 进样量对结果影响不大 4．外标法：以待测组分纯物质为对照