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堑旦人学博上论文 乳腺癌内分泌治疗敏感性调节研究 缩略语表 韭旦人学1释上论文 乳腺癌内分泌治疗敏感性调节研究 中文摘要 乳腺癌细胞内分泌治疗敏感性调节的研究 复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科 博士研究生范江 导师沈镇宙教授 研究目的 应用DNA甲基转移酶抑制剂AZA联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA作用于乳腺 癌细胞株MDA—MB一435，研究是否能够通过这两种药物诱导雌激素受体阴性乳腺 癌细胞株MDA—MB一435重新表达功能性的雌激素受体Ⅱ，并探讨经过药物诱导重 新表达雌激素受体a后其生物学特性的变化以及对于内分泌治疗的敏感性的改 变。 材料与方法 A)与作用于 q，PR以及PS2的mRNA表达水平的改变。 2．通过WST方法来检测乳腺癌细胞的增殖能力变化，将MDA-MB一435细胞根据 药物处理共分四组：①对照组②AZA+TSA③AZA+TSA+4-0HTAM组④4-0H TAM组。同时分析诱导后的MDA—MB一435在不同雌激素浓度中的增殖能力。 umol／L；2．5 3．将MDA—MB一435分为六组，分别以AZA浓度梯度为0umol／L；1 umol／L；10umol／L；20 umol／L；5 来诱导MDA．MB．435细胞株。药物处理96小时后以WST法来测定肿瘤细 胞增殖能力的变化。并且测定联合4-OHTAM作用后MDA—MB．435的增殖 复旦人。≯博上论文 乳腺癌内分泌治疗敏感性调节研究 能力情况。 4．采用流式细胞仪来分析肿瘤细胞周期分布的改变，将MDA—MB一435分成另外 TAM组。 5．建立人乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型，将MDA—MB一435分为三组①对照组② 成瘤能力以及对于雌激素水平的依赖性。 研究结果 1．TSA以及AZA联合应用能使肿瘤细胞MDA—MB一435重新恢复ERQ，PR以及PS2 的mRNA表达。 2．增殖分析的四个组中： 第②组AZA+TSA细胞增殖能力较对照组减弱 (p0．01)。第⑨组AZA+TSA+4一OHTAM增殖能力进一步减弱(pO．01) 第④组单纯4一OHTAM组增殖能力没有改变。另外，经过药物诱导的 MDA—MB一435细胞在不同雌激素浓度中呈现不同程度的增殖能力，在最适雌 激素浓度(1nmol／L)下增殖能力最强。 u 3．AZA浓度梯度的增殖能力测定中在本试验中观察到在诱导浓度为AZA2．5 mol／L、TSA为lOOng／ml时联合4-OHTMVl时MDA—MB一435增殖能力下降最 明显。 4．细胞周期流式细胞仪分析的四个组中： 第②组经过AZA联合TSA联合诱导后 后并加入雌激素后细胞阻滞稍减弱(62．11±0．18％)。第④组 (AZA+TSA+E：+4一OH TAM组中细胞S期阻滞再次提高(77．13±0．31％)。 复旦人学博上论文 乳腺癌内分泌治疗敏感性调节研究 5．体内试验：诱导处理后的MDA—MB一435之移植瘤在体内较未经处理的细胞增 殖能力下降(p0．叭)。通过于术去势去除雌激素后，移植瘤生长受到抑制 增殖能力进一步减弱(pO．01)。 结论 1．两种药物联合应用能使得乳腺癌肿瘤细胞MDA—MB一435重新表达功能性的ER 2．诱导后重新表达ER Q的MDA—MB一435表现出对于雌激素的生长依赖，增殖能 力下降，两药联合诱导对于肿瘤细胞有一定抑制作用。 3．诱导后的表达ERQ