氟喹诺酮体外诱肺炎克雷伯菌耐药的分子机制研究.pdf

广州医学院硕士论文 氟喹诺酮体外诱导肺炎克雷伯菌耐药的分子机制研究 硕士研究生： 韩菊梅 导 师： 叶晓光教授 中文摘要 目的： 1_探讨抗菌药物MIC附近浓度的运用对细菌耐药的影响。 2．探讨诱导后耐药菌在应用外排泵抑制剂前后最低抑菌浓度(MIc)的差异；探讨氟 喹诺酮体外诱导肺炎克雷伯菌前后外排蛋白表达水平的差异。 3．探讨氟喹诺酮体外诱导肺炎克雷伯菌前后膜孔蛋白表达水平的差异。 4．探讨氟喹诺酮体外诱导肺炎克雷伯菌前后QRDR突变情况。 方法： 1．取临床分离对喹诺酮敏感的肺炎克雷伯菌20株，分2组，每组lO株，1组 不加诱导作对照组，观察组则应用不同浓度梯度环丙沙星逐级诱导，最后成为耐药 株，比较人工诱导耐药菌与敏感菌对FQL的MIC差异。 2．测定诱导耐药菌在应用外排泵抑制剂前后对FQL的最低抑菌浓度(MIC)的 差异；用SDS—PAGE电泳观察诱导前后月砌外排泵膜蛋白表达。 3．用SDS—PAGE电泳观察诱导前后月砌膜孔蛋白表达。 分析比较，并将诱导耐药菌与临床分离耐药株比较；用clustalX软件比较分析QR