菊花的组织培养(选定)课件.pptVIP

无菌水清洗 70% 的酒精中 摇动2～3次 6～7s 无菌吸水纸吸水 0.1氯化汞溶液 无菌水清洗 无菌吸水纸吸水 流水冲洗→软刷刷洗→流水冲洗20min→无菌吸水纸吸干外植体表面→体积分数为70﹪的酒精中摇动2～3次，持续6～7s→无菌水清洗→无菌吸水纸吸干外植体表面→质量分数为0.1﹪的氯化汞溶液中1～2min→无菌水中至少清洗3次。 注意事项： 对外植体进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力 项目 顺序 材 料 处理方法 处理 时间 1 流水 冲洗 2 少许洗衣粉 软刷轻轻刷洗 3 流水 冲洗 20 min 4 无菌吸水纸 吸干外植体表面的水分 5 70% 的酒精 摇动2～3次 6～7s 6 无菌水 清洗 7 无菌吸水纸 吸干外植体表面的水分 8 0.1% 氯化汞溶液 浸泡 ？ 1～2 min 9 无菌水 清洗 3次 （二）外植体消毒（菊花茎段：生长旺盛嫩枝） （三）接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟。 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种 插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分。 接种 切段 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在18~22℃，并且每日用日光灯光照12h。 锥形瓶放在培养架上培养 形成愈伤组织 丛状苗 丛芽培养基上培养 生根培养基上培养：生出根 * 蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。其晶体结构为单斜晶系，从外形上它看上去像云母。蛭石是一定的花岗岩水合时产生的。它一般与石棉同时产生。由于蛭石有离子交换的能力，它对土壤的营养有极大的作用。 　　蛭石的化学式为（Mg，Ca）0.7（Mg，Fe，Al）6.0[（Al，Si）8.0]（OH4.8H2O）。 菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物,是我国的传统名花和世界四大切花之一。长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖。 但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长,随着市场需求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展的需要。 植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗。 菊花的组织培养 一、基础知识 1、植物的组织培养 （1）细胞的分化 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 。 a、特点： 持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度； 稳定性：细胞分化是稳定的，一般不可逆转； 全能性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能。 c、原理：基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 b、结果：形成不同的细胞和组织 （2）细胞的全能性 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 1958年，美国植物学家斯图尔德等人，用胡萝卜韧皮部的组织块进行离体培养，得到了完整的植株,并且能够开花结果。 成熟的胡萝卜植株 胡萝卜肉质根薄片 胡萝卜试管苗 胚状体发育 离体培养 （3）植物组织培养 必要条件： 细胞离体 一定的营养物质、激素和其他外界条件 原理:细胞的全能性 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。 离体组织或器官或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植株 移栽 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 快速繁殖、高效率繁殖。 生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。 转基因植物的培育。 培养无病毒植株。 植物组织培养的用途： （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，枸杞愈伤组织的芽诱导比较难。 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果。 （二)影响植物组织培养的因素 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 菊花的组织培养一般选择未开花植株