第二章各种工具酶解析.pptVIP

第二章 各种工具酶 内容提要 第一节 限制性核酸内切酶 第二节 DNA 连接酶 第三节 DNA聚合酶 (聚合酶 I /Taq聚合酶 /反转录酶) 第一节 限制性核酸内切酶 Restriction endonuclease （RE） 一、限制性核酸内切酶的概念 二、限制性内切酶的命名 三、限制性内切酶的类型 四、影响限制性酶活性的因素 五、限制性内切酶对DNA的消化 一、概念 1. 定义 是一类能够识别双链DNA中的特定核苷酸序列，并在特定位点切割双链DNA的内切酶。 2. 来源 细菌的限制性内切酶。 3. 功能 (1) 限制 Restriction 侵入细菌体内的外源DNA（非甲基化），能被限制性内切酶识别和降解，从而保护自身的DNA不被降解。 图 细菌的限制系统 (2) 修饰 Modification 细菌自身的DNA可被甲基化酶修饰，从而防止限制性内切酶的识别和水解。 ① Dam甲基化酶 在GATC序列的腺嘌呤N6位引入甲基。 ② Dcm甲基化酶 在CCAGG序列的第2个胞嘧啶C5位引入甲基。 图 细菌的修饰系统 图 甲基化位点：DNA上的 A/C 二、限制性内切酶的命名 1973年Smith等提出酶的命名原则。 用属名的第一个字母和种名的头两个字母，表示宿主菌的物种名。如大肠杆菌（Escherichia coli）用Eco表示。用一个大写