第二章+基因工程载体和工具酶解析.ppt

第二章 基因工程载体和工具酶 湖南师范大学生命科学学院 袁婺洲 本章目录 2.1 载体 2.1.1 质粒载体 2.1.2 噬菌体载体 2.1.3 其他载体 2.2 工具酶 2.2.1 限制性核酸内切酶 2.2.2 DNA聚合酶和Klenow大片段 2.2.3 DNA连接酶 2.2.4 碱性磷酸酶 2.2.5 末端脱氧核苷酸转移酶 第二章 基因工程载体和工具酶 1. 质粒 plasmid 细菌染色体外的遗传因子，闭合环状双链DNA 大小：1-200kb 能自主复制，但要利用寄主细胞复制染色体的同一组酶系 复制分松弛型和严谨型两种 松弛型：10-200 拷贝（加氯霉素扩增） 严谨型： 1-10 拷贝 有某些基因，如抗药性基因，对寄主的生长是有利的 天然质粒 LacZ基因表达的蓝白斑菌落 基因工程质粒：Plasmid pBR322 松驰型质粒 Ampr， Tetr 多种限制性酶切位点 全长 4362 bp Plasmid pBR322结构图 Plasmid plink 322 在pBR322基础上改建，增加了一个多接头（polylinker），即增加了多克隆位点。 全长 3.8 kb Plasmid plink 322 pUC 质粒(University of California) pUC 质粒 是由大肠杆菌 pBR322 质粒 与M13