第六章基因的重组与转移解析.pptVIP

第六章基因的重组与转移 第一节 受体细胞 第二节 重组体导入受体细胞 2. 菌种的选择 3. 制备原理 4. 制备过程 2. 转化率 （1）热休克法 （2）电转化法 4. 平板培养基培养细菌 5. 影响转化率的因素 （2）感受态细胞 （competent cells) 6. 体外包装的噬菌体的转导 第三节 外源基因导入真核细胞 2. 酵母的转化方法 （2）利用Li+盐进行转化 二、导入植物细胞 2. 电击法（electroporation) 3.基因枪法（gene gun） 三、导入哺乳动物细胞 （2）特点： 2. 脂质体（lipofectin）载体法 3. 显微注射法(microinjection) 4. DEAE---葡萄糖传染法 外源基因导入细胞的方法 酵母 0.1mol/L LiCl处理 插入外源基因的酵母载体 感受态 40% PEG 4000 叶盘 消毒 切取 土壤农杆菌浸泡 看护培养基 愈伤组织 分化幼苗 1. 叶盘法（leaf disk） 植物细胞 原生质体 纤维素酶和果胶酶 DNA 混合入电击缓冲液 1-2kV, 3-25?F电击 愈伤组织 幼苗 分化 又称高速微型子弹射击法（High-velocity microprojectiles) DNA 1.2?m钨弹头 吸附 特制手枪 射击植物 装入 4. 农杆菌（agrobacterium）介导 （1）原