谈乙烯利刺激对檀香叶中总黄酮含量的影响.docVIP

谈乙烯利刺激对檀香叶中总黄酮含量的影响 摘要：　建立檀香叶总黄酮含量的测定方法,分析乙烯利刺激对檀香叶中总黄酮含量的影响。采用紫外分光光度法测定檀香叶中总黄酮含量。未经刺激的檀香叶总黄酮含量在6967～7281 mg/g之间。经过刺激的檀香叶总黄酮含量在10571～16798 mg/g之间。乙烯利刺激能提高檀香叶中总黄酮含量。 关键词： 檀香/化学 总黄酮/分析 乙烯利刺激 分光光度法,紫外 　　名贵中药檀香为檀香科Santalaceae檀香属Santalum植物檀香Santalum album L的树干心材,性温味辛,入脾、胃、肺经,具有理气温中、开胃止痛的功效［1］。檀香原产于印度、印度尼西亚等地,1962年我国开始从印尼引种檀香［2］,到目前为止广东省引种檀香面积已经超过333335公顷。 　　植物激素刺激在一定程度上能促使檀香提前结香,提高挥发油含量且不影响檀香品质［3-5］。目前国内外对檀香研究的报道主要集中于檀香栽培种植技术和檀香挥发油组分分析以及檀香药材质量评价上［6］。本研究在乙烯利刺激檀香结香试验的同时,分析测定了檀香叶中总黄酮含量,并探讨了乙烯利刺激对其含量的影响。现报道如下。 　　1　材料、仪器与试剂 　　1.1　实验材料及处理檀香叶样品采自广东省湛江南药试验场,树龄均为5年，采集时间和处理方式见表1。乙烯利刺激为在檀香树干距地面20 cm处钻孔,用胶带封好洞口后,注射一定量不同浓度的乙烯利溶液,注射相同量水即为水刺激。采集部位为檀香树中上部,檀香原植物经广东省中药研究所邱金裕研究员鉴定为檀香科植物檀香Santalum album L.。采摘后的叶子自然平摊失水后50烘干,粉碎后过60目筛,干燥器中室温密封保存。表1不同样品采集时间和处理方式（略） 　　1.2　仪器与试剂8453E型紫外可见分光光度计(美国Agilent)；EP211D电子分析天平(德国) 　　2　方法与结果 　　2.1　溶液的制备 　　2.1.1　芦丁对照品溶液的制备精密称取经105干燥至恒重的芦丁标准品适量,加甲醇溶解并定容至50 mL,配成03048 mg/mL的芦丁标准溶液。 　　2.1.2　样品溶液的制备精密称取檀香叶粉末(过3号筛)10 g,置于索氏提取器中,加石油醚(60～90)150 mL,水浴回流提取25 h以上,直至石油醚无色,挥尽样品中的石油醚,加甲醇150 mL,再置水浴锅中索氏回流提取4 h以上,直至甲醇无色,冷却后滤过,并用甲醇少量多次洗涤滤器,滤液转移至250 mL的容量瓶中,甲醇定容至刻度,制得供试品溶液。 　　2.2　波长的选择取对照品溶液和样品溶液适量,移入25 mL的容量瓶中,加入甲醇至6 mL,各加50 g/L的亚硝酸钠溶液10 mL,振摇后放置6 min,再加入100 g/L的硝酸铝溶液10 mL,摇匀后放置6 min,加10 mol/L氢氧化钠溶液10 mL,用甲醇定容至刻度,摇匀后放置15 min。以 0 mL为空白,采用紫外—可见光分光光度法［1］,在200～800 nm波长范围内进行扫描,结果对照品和样品在500 nm处均有最大吸收,见图1。 　　2.3　标准曲线的绘制分别精密量取芦丁标准溶液0、100、200、300、400、500、600 mL,按22项下方法操作显色,以加0 mL为空白,在500 nm处测定吸光度,以溶液中芦丁的量为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制标准曲线,得直线回归方程为Y=10671X-0001(r=0999 1),线性范围0012 2～0073 2 mg/mL。 　2.4　方法学考察 　　2.4.1　精密度试验取对照品溶液,按照22项下方法,在波长500 nm处测定吸光度,连续测定5次,结果其吸光度的均值为04619,sR为031%,表明精密度良好。 　　2.4.2　重复性试验精密称取同一供试品10 g,平行5份,按212项下方法提取及22项下方法测定其黄酮含量,结果含量均值为7023 mg/g,sR为035%,表明该方法的重复性较好。 　　2.4.3　稳定性试验取同一供试品溶液,分别在0、15、30、45、60 min测定其吸光度,结果其吸光度均值为04693,sR为150%,说明供试品溶液在60 min内稳定。 　　2.4.4　加样回收率试验精密称取已测含量的样品S1(含量6967 mg/g),加入芦丁进行回收率试验,结果其平均回收率为10032%,sR为203%,见表2。表2回收率试验结果（略） 　　2.5　样品测定分别吸取上述供试品溶液各