第三讲神经干细胞分析.ppt

2、脊髓局部注射移植 是目前治疗脊髓损伤的动物实验和临床研究多采用的干细胞移植方法。该技术主要是在脊髓损伤的节段进行手术，依次切开皮肤、肌肉、韧带，咬除受伤节段的部分椎板，剪开硬脊膜然后在受伤脊髓节段上下两端注射干细胞。 优点：移植的细胞分布在损伤脊髓两端发挥作用，同时手术可以起到减压的作用，促进部分脊髓功能的恢复。 缺点：创伤大，存在出血的风险，此外手术本身对脊髓是一次新的损伤有可能加重神经功能的缺失。 二、经脑脊液途径移植 1、腰椎穿刺蛛网膜下腔注射移植 是目前另一种较多采用的移植方法。该方法是利用腰椎穿刺技术,于腰椎3-5椎间隙，置入穿刺针达到蛛网膜下腔，注入神经干细胞。 原理：移植的细胞可以顺着脑脊液的循环途径流遍整个大脑和脊髓，可在宿主蛛网膜下腔中保持贴附、增殖和分化的能力，无论哪里有病灶，细胞都可以到达 适应症：适合于病变较为广泛的神经功能疾病的治疗，例如脑炎后遗症、脑发育不良等疾病。 优点：创伤很小，每次操作只需要十多分钟，病人始终处于清醒状态。 缺点： （1）植的干细胞被分散到整个大脑和脊髓，干细胞迁移、趋行到什么部位难以控制，治疗效果没有定向脑内注射明确； （2）干细胞需要顺着脑脊液循环至大脑，路径较长，且需通过脑脊液-脑屏障，细胞损失较多； （3）干细胞直接进入脑脊液中，为环境完全不同于体外培养的环境，干细胞存活的数量仍存在疑问。 2、脑室穿刺注射移植 　　部分动物实验和临床研究采用。该方法是给予患者侧脑室穿刺后，经穿刺针注射神经干细胞。 原理：移植神经的干细胞可以特异性的迁移至脑损伤区域 优点： （1）干细胞可以直接到达脑室系统，循环至整个神经 （2）移植点位于高位，路径较短，干细胞损失较少 （3）植入细胞可远离损伤环境，同时避免损伤区的不良微环境影响移植细胞的成活，从而提高植入细胞的存活率 （4）避免经脑内移植时的容积占位效应，增加植入细胞的数量 （5）脑室内环境也为植入的NSCs提供了良好的迁移发育和定向分化的场所，有利于脑室植入细胞在内源性NSCs的迁移途径引导下，广泛快速地到达脑内损伤区。 二、经脑脊液途径移植 2、脑室穿刺注射移植 　缺点： （1）要经过脑脊液循环到达病灶区，需要移植的细胞数量要增加 （2）脑室穿刺创伤较腰椎穿刺大，有穿刺出血的风险。 脑室穿刺细胞移植与腰椎穿刺细胞移植的治疗原理和效果应该是基本相同，如果此移植途径可行，在临床上可以直接通过腰椎穿刺蛛网膜下腔注射进行细胞移植。 二、经脑脊液途径移植 三、血液循环途径移植 1、静脉内注射移植： 　目前仅见于动物实验的文献报道，个别医院也在应用该方法，但尚未正式报道。该方法是使用静脉穿刺的方法，将神经干细胞滴入血液循环，干细胞通过血液循环到达神经系统，透过血脑屏障到达脑组织发挥作用。 优点：是创伤小、容易被患者所接受，经静脉移植避免损伤正常脑组织，且可以通过反复多次移植来弥补到达病灶区NSCs少之不足。 缺点：从外周静脉进入脑内需经长时迁移，最后进入脑内的细胞数量十分有限，从而导致移植成功率不高。从理论上来讲，大量的移植细胞没有进入所希望治疗的病灶区域，而是在血液循环中消耗掉了，加大移植细胞的数量的话，理论上可能有足够数量的干细胞进入病灶区域发挥作用，但同时会使治疗成本升高。 　 2、动脉内注射移植 　　原理基本与静脉内注射移植相同，主要是部分学者考虑通过直接将干细胞在供脑动脉内注射，可以减少干细胞在血液循环中的损失，提高干细胞的利用率。多采用颈内动脉穿刺的方法移植干细胞。 优点：这样可以使移植的干细胞集中流到脑组织内部，减少细胞耗损。 缺点：可能使老年患者动脉壁上的血栓脱落形成新的脑血栓，以及可能形成夹层动脉瘤。 　以上几种干细胞移植途径各有优缺点，均为干细胞的动物实验及临床研究提供了移植方法。很难评价各种方法的优劣，而应该在各种方法的完善上进一步进行研究，掌握每种方法的适应证，必要时可以两种或两种以上方法联合应用，以达到最好的治疗效果。 三、血液循环途径移植 需要转染基因的原因： 1.内源性神经干细胞的数量不足，损伤局部的微环境不适宜神经细胞的再生。单纯补充干细胞的数量是不够的，可以通过转基因技术，将编码神经营养因子等的基因片段导入神经干细胞中，使其在移植部位进行表达，改善局部微环境，以维持细胞的生存和增殖。 2. 为了达到某种特殊的治疗目的，也需要对移植的神经干细胞进行基因修饰，使其在局部产生特殊的蛋白质，如用于治疗中枢神经系统肿瘤时，让其产生抗癌药物;治疗帕金森病时，让其产生多巴胺等。 3. 一些大分子物质如神经生长因子（NGF）、脑源性生长因子，尽管有治疗作用，却不能通过血脑屏障，其治疗作用受到限制； 基因治疗的载体 神经干细胞具有转基