普洱茶黄酮类物质对Dgalactose诱导氧化应激大鼠GSHPx活性影响的研究资料.ppt

课题来源 研究背景 自由基与多种疾病的关系，已愈来愈被重视，自由基生物医学的发展使得探寻高效低毒的自由基清除剂——天然抗氧化剂成为生物化学和医药学的研究热点。 研究表明，普洱茶具有抗氧化、降血脂、降血糖、抗突变、防癌及防治心血管疾病等功能。 对普洱茶中活性物质具有抗氧化作用的研究越来越深入，而普洱茶黄酮类物质是否具有抗氧化作用，以及其抗氧化作用是如何发挥的还鲜见报道。 研究目的 因此，本次试验采用柱层析法以不同乙醇浓度（50%，30%，10%）洗脱液获得的普洱茶黄酮类物质为原料，以由D-半乳糖诱导引起的氧化损伤试验大鼠为模型动物，对其持续分别经口灌胃普洱茶黄酮类物质50%（高、中、低）、30%（高、中、低）、10%（低高、中、低）4周后，牺牲试验动物，测定其主要脏器（心，肝、脑与肾）组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，并确定其剂量-效应关系。揭示普洱茶黄酮类物质的抗氧化作用, 为普洱茶的抗氧化功能评价提供理论依据。 材料与方法 （一）实验材料 受试样品：普洱茶黄酮类物质，由云南农业大学普洱茶学院李家华老师提供。 （1）No.1：50%乙醇洗脱物； （2）No.2：30%乙醇洗脱物； （3）No.3：10%乙醇洗脱物。 受试药品：Vitamin E（经过国际上证明用于抗氧化应激有效的药物 ） 实验动物：8周龄，SPF级近交系SD大鼠，雌雄各半，体重180.0-220.0g。 动物饲料：基础饲料 　　 试验仪器：实验鼠笼、灌胃器具、80-1/2低速离心机、80-2电动离心机、HH-6数显恒温水浴锅、20μL 微量采血管、XW-80A旋涡混合器、Epppendorf-4910单道微量可调移液器、SUNRISE 酶标仪。　　　 其他：磨口瓶、秒表、注射器、剪刀、移液管、烧杯、玻璃匀浆器、手术刀等。 主要试剂: 牛血清白蛋白、考马斯蛋白测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）测定试剂盒。 实验流程图： （二）实验方法 2.实验动物分组及剂量确定 眼眶采血 建模分组 阳性（D-半乳糖模型）对照组与灌胃普洱茶黄酮类的乙醇洗脱物组相比 3.实验记录 心、肝、脑和肾组织GSH—Px的活性测量：由北京大学医学部实验动物中心 提供测试盒，严格按照实验步骤进行测试。 数据处理：数据显示为均值±标准差（Mean±S.D.），不同组别的比较采用one way ANOVA with T-test统计学检验, 统计学检验采用Microsoft excel 软件完成。 结果与分析 1、普洱茶黄酮类提取物对D-galactose诱导氧化应激大鼠心肌组织中谷胱甘肽超氧化物歧化酶（GSH-Px）活性的影响 2、普洱茶黄酮类提取物对D-galactose诱导氧化应激大鼠肝组织中谷胱甘肽超氧化物歧化酶（GSH-Px）活性的影响 3、普洱茶黄酮类提取物对D-galactose诱导氧化应激大鼠脑组织中谷胱甘肽超氧化物歧化酶（GSH-Px）活性的影响 4、普洱茶黄酮类提取物对D-galactose诱导氧化应激大鼠肾组织中谷胱甘肽超氧化物歧化酶（GSH-Px）活性的影响 结论 综上所述，普洱茶黄酮类提取物50%，30%和10%的乙醇洗脱物均具有增加D-galactose诱导氧化应激模型大鼠主要脏器（心，肝、脑与肾）组织中GSH-Px活性的作用，并具有剂量-效应关系，且三种物质的作用相当，揭示普洱茶黄酮类物质具有良好的抗氧化作用，其作用机制还有待进一步研究 致谢 首先感谢云南农业大学，感谢答辩委员会的各位老师，在四年的学习中能有机会聆听各位老师的教诲！ 本课题是在侯艳老师亲切关怀与细心指导下完成的。在此向您献上我最诚挚的谢意！ 在实验过程中得到了秦庭发、施瀚超师兄、王蕊师姐、同学蔡官敏、周荣丽、及昆明医学院相关工作人员的全力帮助和支持，再次一并致谢！ 恳请各位老师批评指正！ * * 普洱茶黄酮类物质对D-galactose诱导氧化应激大鼠GSH-Px活性影响的研究 指导老师：侯 艳（讲师） 姓 名：李银丽 学 号：2010312657 班 级：10茶艺 类 型：科研型 课题来源 研究背景及目的 材料与方法 结果与分析 目 录 结论 测定大鼠肾组织中GSH—Px的活性 测定大鼠心肌组织中GSH—Px的活性 测定大鼠肝组织中GSH—Px的活性 动物试验 过氧化模型的建立 测定大鼠脑组织中GSH—Px的活性 普洱茶黄酮类物质的乙醇洗脱物 观察喂养三天、分组 灌胃28天 阶段 时间（天） 腹腔注射 灌胃 适应性喂养 7 无 无 D-Gla