神经营养因子解读.pptVIP

* 神经营养因子的临床应用前景 外周感觉神经病 主要原因：外周感觉神经元的退化。 治疗：NGF为主 * 神经营养因子的临床应用前景 神经营养素为蛋白质，难以通过血脑屏障，故不能直接通过全身给药治疗中枢神经系统疾病 脑内给药 利用蛋白修饰增加穿过血脑屏障的能力 利用基因工程手段增加NTF的功能，扩大应用范围 多种NTF联用 寻找调控NTF及其受体表达或启动信号转导的小分子物质 * 遗留的问题 找到靶组织以前，神经元靠什么活着？ 在CNS中还没有发现神经元存活数目与NT的联系 敲除NT 或者Trk受体，可以发现引起可预测的PNS的缺陷，但对CNS的结构和功能的影响非常小。 * 目前的研究 介导的信号 受体降解速率 激活另外通路 抑制了去磷酸化的过程 * 分泌方式的调控 * 膜表面受体量的调控 * 受体内吞后命运的调控 * * THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY VOL. 284, NO. 22, pp. 15126–15136, May 29, 2009 * 如果 ~~~ 你~~ 提纯出了一种蛋白~~ 证明了它具有神经营养因子的特点 * 你的选择 A: 发了吧赶紧，发一个4-5分的 B: 得到DNA序列，表达模式，发一个7-8分的 C: 敲掉看看，做些功能，发个cell D: 找到受体，再发个cell E: Boss 决定 * 知道蛋白序列，怎样找到DNA序列？ 兼并引物，PCR 表达文库，用抗体钓 基因组测序的数据 怎样找到受体 酵母双杂交 免疫共沉淀 GST-pull down CO-IP 结合质谱 …… * * Concept of Neurotrophic Factor (NTF) 神经营养因子是机体产生的能够促进神经细胞存活、生长、分化的一类多肽或蛋白质因子,它不仅在发育过程中调节神经元的存活, 而且能阻止成年神经元损伤后的死亡,促进神经元的修复、轴突再生、调节突触可塑性和神经递质传递等神经系统功能。 NTF-神奇的神经元营养品 路漫漫其修远兮~~~ 吾将上下而求索 * 谢谢各位的时间！！ * 神经生物学课的目的 神经营养因子名字的来历 * 几个世纪以来,人们都相信成年后,在患上神经退行性疾病或者头部损伤后,中枢神经系统不能不能再生. 发现于胚胎 作用于老年 * 神经系统与组织的匹配 大量神经元——死亡-精确的数目 * 支配神经元的靶标分泌某种信号来招募未分化细胞发育成为感觉或运动神经元. Target cells secrete limited amounts of a neurotrophic substance, sensed by specific cell surface receptors. Cells compete for these factors. Those that do not receive sufficient amounts are fated to die. * Knockdown and 过表达 * 另一个准则参与了最终神经元的发生：一个普遍的，令人惊叹的策略存在于发育的哺乳动物的体内，即最初生产出过量的神经细胞，可能是2-3倍，而最终数目的确定则是后来由很多神经元的死掉，这些神经元就是由于没能成功得与其潜在靶标建立联系。而这种多余神经元的消除就是被神经营养因子介导的。 * * 第一个神经营养因子----NGF的发现 鸡胚背根神经节组织培养技术 蛇毒和小鼠颌下腺 * sympathetic neurons * 肌梭 麦克尔氏触盘 * 胆碱乙酰转移酶 * * * * Trk受体的分布 TrkA分布在交感、感觉、运动神经元及基底前脑 TrkB分布在整个NS中，在肺、肌肉也有少量表达 TrkC主要在大脑皮质，海马，小脑表达；TrkC与NT-3在外周分布的不一致性 * * Trk受体的信号转导 PLC-IP3/DAG IP3-Ca2+/CaM： 可诱导LTP，促进神经突起的生长，调节中枢突触神经递质的受体分型 DAG/Ca2+-PKC： 生长相关蛋白GAP-43 (growth associated protein-43)是PKC的一个底物，它在成熟突触中是神经发育、神经连接再生和突触可塑性的一个决定因子 * p75NTR structure NGF KD=10-9M (all neurotrophins can bind p75NTR) Roux and Barker (2002) Prog Neurobiol 67:203-233 * p75NTR的结构特点 胞外区： 4个重复的富